柞蚕肠道好氧细菌的鉴定及α-淀粉酶基因的克隆与表达分析

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1、；ｆ家读乂４硕女嗦化俗戈炸蚕肠道好氧细菌的鉴定及ａ－淀紛酶基因的克隆与表达分祈研究生：黄伶指导教师：秦禾！Ｊ教授专业名称：动物学研究方向：动物细胞学与分子生物学所在学院：生物科学技术学晓２０巧年６月ＤｉｓｓｅｒｔａｔｉｏｎｆｏｒＭａｓｔｅｒＩｓｏｌａｔｉｏｎｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎｏｆｉｎｔｅｓｔｉｎａｌａｅｒｏｂｉｃｂａｃｔｅｒｉａｆｒｏｍｔｈｅ，ｌａｒｖａｏｆｔｈｅＣｈｉｎｅｓｅｏａｋｓｉｌｋｗｏｒｍ，＾巧说ｅｒ幻６幻只６尸灼ａｎｄ

2、＊－ｍｏｌｅｃｕｌ泌ｃｌｏｏｉ打ｇｅｘｉｅｓｓｉｏ打ａｎａｌｓｉｓｏｆａａｍｌａｓｅｏｆ乂，ｐｙｙｐｅｒｎｙｉＣａｎｄｉｄａｔｅ：ＨｕａｎｇＬｉｎｇＳｕｅｒｖｉｓｏｒ．ｉｎＬｉｐ：ＰｒｏｆＱＳｅｃｉａｌｉｔ；ＺｏｏｌｏｐｙｇｙＲｅｓｅａｒｃｈＦｉｅｌｄ：ＡｎｉｍａｌＣｅｌｌａｎｄＭｏｌｅｃｕｌａｒＢｉｏｌｏｇｙＳｈｅｎａｎＡｒｉｃｕｌｔｕｒｅＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙｇｇｙＪｕｎｅ，２０１５独创性声明本人声明所呈交的论文是我个人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。

3、尽我所知，除了文中特别加标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得沈阳农业大学或其它教育机构的学位或证书而使用过的材料一。与我同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示了谢意。研究生签名时间；曰＞／３导师签名；时间；义？／ｒ年／＾月（＾日奈每关于论文知巧产权和使用授权的说明本论文的知识产权为沈阳农业大学所有。本人完全了解沈阳农业大学有关保留、使用学位论文的规定，，即；学校有权保留送交论文的复印件和磁盘允许论文被查阅和借、。阅，可Ｗ采用影印缩印或

4、扫描等复制手段保存、汇编学位论文同意沈阳农业大学可用不同方式在不同媒体上发表、传播学位论文的内容。学位论文中的所有内容不经沈阳农业大学授权不得Ｗ任何方式擅自对外发表。（保密的学位论文在解密后应遵守此协议）研究生签名；时间：年＾月／＞１￥矣日；导师签名；时间皮年＾月日如／之／沈阳农业大学硕±学位论文目录摘要１Ａｂｓｔｒａｃｔ２一第章绪论３１．１巧蚕的组织结构及生理功能３１．２昆虫肠道微生物的研究现状３１．３昆虫肠道微生物的功能６１．３．１肠道微生物为昆虫提供营养物质６

5、１．１２肠道微生物参与昆虫体内氮循环７１．３．３肠道微生物参与降解大分子难溶物质７１３４肠道．．微生物影响宿主昆虫的抵抗力及免疫力７１．３．５其它作用７１４．昆虫肠道微生物的研究方法８１１．４．传统分类鉴定方法８１．４．２分子生物学方法８－１．５ａ淀粉酶研究进展９１１．６本文研究内容及意义０第二章巧蚕卵内好氧细菌的分离鉴定１１２．１试验材料１１２丄１供试材料１１２丄２药品试剂１１２丄３仪器设备１２２．２试验方法１２２．２．１巧蚕卵内细菌培养１２２．２

6、．２１２巧蚕卵内细菌生理生化试验２．２．３巧蚕卵内细菌１６ＳｒＤＮＡ序列扩增及序列分析１２１２．３结果与分析３２．３．１菌株的形态及生理生化鉴定１３２．３．２细菌的１６ＳｒＤＮＡ基因扩增及系统进化分析１４２１．４讨论５Ｉ目录第三章作蚕幼虫肠道好氧细菌的分离及鉴定１６３．１材料１６３丄１试验昆虫１６３丄２试剂及设备１６３丄３试剂配制１６３丄４培养基配制１７３．２试验方法１７３．２．１巧蚕幼虫肠道绑菌分离及鉴定方法１７１８３．２．２不同龄期巧霉幼虫肠道

7、细菌分离鉴定３．３结果与分析１８３．３．１不同培养基分离菌株及生理生化鉴定１８３．３．２细菌菌株的ＡＲＤＲＡ鉴定２０３３．３细菌茵株６ＳｒＤＮＡ序列的２０１系统进化分析３．３．４不同龄期巧蚕幼虫肠道细菌的分离鉴定２１３２４．４Ｈ论第四章巧蚕幼虫肠道纤维素降解茵筛选与产酶特性的相关研究２６４．１２６４丄１试验材料２６４丄２试验相关试剂及培养基的配制２６４丄３仪器设备２７４．２试验方法２７４．２．１纤维素分解细菌的筛选２７＇４．２．２纤维素酶液的制备

8、２７４２７．２．３纤维素酶活性的测定４．２．４培养条件对酶活力的影响２８４．３结果与分析２８