硕士毕业论文-纳他霉素产生菌的选育及其胞外调控的研究

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1、分类号UDC密级编号硕士学位论文纳他霉素产生菌的选育及其胞外调控的研究Breedingofnatamycinproducingstrainandtheresearchofextracellularregulated学位申请人：王亚洲指导教师：古绍彬副教授一级学科：生物学二级学科：生物化学与分子生物学学位类别：理学硕士2015年06月独创性声明本人声明，所呈交的论文是我个人在导师指导下完成的研究工作及取得的研究成果。据我所知，文中除了特别加以标注和致谢的地方外，不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得河南科技大学或其它教育

2、机构的其他学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示了谢意。研究生签名：日期：关于论文使用授权的说明本人完全了解河南科技大学有关保留、使用学位论文的规定，即：学校拥有对所有学位论文的复制权、传播权、汇编权及其它使用权（特殊情况需要保密的论文应提前说明，但在解密后应遵守此规定）。需要保密的论文请填写：本学位论文在年月至年月期间需要保密，解密后适用本授权书。（需要保密的学位论文无须向图书馆提供论文的电子文档）研究生签名：导师签名：日期：摘要摘要随着人们对食品安全意识的提高，人们对食品

3、防腐剂的使用更加重视和谨慎，纳他霉素(Natamycin)是由链霉菌发酵产生的次级代谢产物，是一种高效、广谱、安全的二十六元多烯大环内酯类真菌抑制剂，作为新型的生物防腐剂被广泛的应用于食品与医药领域中。天然生物防腐剂纳他霉素的市场需求逐渐变大，但目前纳他霉素发酵水平较低，导致成本太高。国内外对提高纳他霉素产量的研究大多侧重于菌种选育和发酵工艺优化方面，但目前纳他霉素产量还是比较低，价格较高。因此，为提高纳他霉素的产量探索一些新的方法和途径具有重要的意义。本文通过复合诱变筛选出一株纳他霉素高产菌株，并对纳塔尔链霉菌进行胞外调控研究。以a

4、tcc37448(纳塔尔链霉菌4.3505）为出发菌株，进行紫外和微波复合诱变。通过实验确定最佳的紫外诱变条件为：紫外灯管30W，距离25cm，照射时间120s；最佳的微波诱变条件为：最大输出功率800W，额定频率2450MHz，处理时间50s。在此条件下，筛选出一株高产菌株M-65，其发酵生产纳他霉素的产量达到1.647g/L，较出发菌株的产量提高了28.56%。分别向纳塔尔链霉菌发酵培养基中添加乙酸钠、丙酸钠、丁酸钠、乙醇、正丙醇和正丁醇等不同前体，研究了其对纳他霉素产量的影响，发现这些前体均能有效的提高纳他霉素的产量，其中丙酸钠

5、和乙酸钠的作用效果较好。然后通过对添加工艺的优化，确定丙酸钠和乙酸钠的最佳添加量均为0.6%，最佳的添加时间均为接种后24h时；乙酸钠和丙酸钠混合添加时的最适比例为7:1，使纳他霉素的产量达到3.174g/L，较对照组提高了92.71%。通过对黑曲霉、产黄青霉、米曲霉、酿酒酵母等四种真菌的细胞诱导子和代谢产物诱导子进行对比筛选，得出产黄青霉代谢产物诱导子对纳他霉素生物合成的促进效果最强，使纳他霉素产量达到2.871g/L，较原始产量(1.647g/L)提高了74.32%。接着对诱导条件进行优化，得到最佳诱导条件：产黄青霉代谢产物诱导子

6、的最优培养时间为2d，在纳塔尔链霉菌发酵24h时加入，发酵至120h，纳他霉素的产量可达3.316g/L，较对照组提高了101.34%。关键词：纳塔尔链霉菌；纳他霉素；复合诱变；前体；真菌诱导子论文类型：应用基础研究选题来源：企业单位委托项目IABSTRACTABSTRACTWiththeimprovementofpeople'sawarenessoffoodsafety,peoplepaymoreattentiontotheuseoffoodpreservatives.Natamycin,whichisasecondarymetab

7、olitesproducedbyStreptomycesfermentation,isanefficient,broad-spectrumandsafe26carbon-ringantifungalantibioticandasanewtypeofbiologicalpreservativeswidelyusedinfoodandmedicinefield.Naturalbiologicalpreservativenatamycinsatisfiedmarketdemandgraduallybecomelarger,butthenat

8、amycinfermentationlevelisrelativelylow,resultinginthecostistoohigh.Thedomesticandforeignresearchonimprovingthe