灰黄霉素产生菌fs80的诱变选育的的研究

灰黄霉素产生菌fs80的诱变选育的的研究

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1、福建师范大学张剑清硕士学位论文少,发酵产灰黄霉素效价比出发菌株FS80.1及突变株LDl00.1高。关键词:诱变:激光;灰黄霉素:效价;发酵;IIAbstractGriseofulvinproducingstrainPenicilliumpatulumFS80-1wastakenastheoriginalstrain,combinedtreatmentofUVandLiCl,thehi曲-yieldmutantGM120·43wasobtainedafterthreegenerationsofselection,whichproducinggrise

2、ofulvincapacitycouldbe89496I-tg/gusingdiazoniumsaltcolordetection,comparedwiththeoriginalstrainFSS0-1whichincreasedby80.04%.MutantstrainGMl20-43geneticstabilitywaswell.Andthen,mutantGM120-43wastakenastheoriginalstrain,mutantLDI00-1andC1448—1wererespectiveobtainedbysemiconductor

3、andC02laser.Aftergeneticstabilitytest,thetiterofmutantLDI00-1producinggriseofulvinWas19766pedg,improved22.58%thantheoriginalstrainGMl20-43.ThemutantC1448·lobtainedbytheC02lasertestedbygeneticstability,whichproductionofgriseofulvinWaslowerthanstrainGMl20-43.Thesolidculturecondit

4、iomofmutantLDl00-1wereresearched,theresultsshowthat:theoptimumcarbonSOUrC2substrateWasWanxianMi;theoptimumnitrogenWasNaN01;thesuitableradioofmediumsolidtowaterWas1:O.75;thesuitableprecursorschlorideforthesynthesisofgriseofulvinwassingleaddingNaCI,andtheconcentrationofchlorideWa

5、sO.188mol/LWasmoreappropriate.;Seedswereinoculated、)lri吐1liquid,thesuitableageofinoculatedliquidseedwas44h'inoculumwas10%.Afteroptimizationofcultureconditions,thetiterofgriseofulvinproductedbystrainLDl00一lWas162233“g/g,whichincreasedby39.16%beforeoptimization.Tllecultureriscesp

6、roeofstrainoriginalstrainFS80—1andmutantGMl20—43,LD100-1wereextractedwithethan01.ThecontentofgriseofulvininextractsWasdetectedbyHPLC,comparedwimthedifferencedetectionmethodsofHPLCanddiazoniumsaltcolor,theresultsshowedthat:thecapacityofstrainFS80·1,GMl20·43andLDl00一lproducinggri

7、seofulvinwere43511rtg/g.91858Itg/gand105423p∥g,whichwerelowerthanthediazoniumsaltcolormethod.ExtractthegenomicDNAofmutantGMl20-43,LDl00-1andoriginalstrainFS80-1.,andtakegenomicDNAastemplate,using18SuniversalprimersforPCRamplification,sequencingtheamplified18SrDNAandcomparedeach

8、other.TheresultsshowedthatthedifferencesbetweenmutantG

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