三氯乙酸终止液对木瓜蛋白酶酶活测定的影响研究

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1、※基础研究饮料工业2015，Vol.18，No.123三氯乙酸终止液对木瓜蛋白酶酶活测定的影响研究莫祺晖，韦星明，李槐，卢拓方，欧娜（广西科学院生物研究所，广西南宁530007）摘要：本实验研究了不同的三氯乙酸终止液，对木瓜蛋白酶酶活的影响。通过使用两种检测方法，不同配方的三氯乙酸终止液进行实验。结果表明，使用两种不同配方的三氯乙酸终止液所得的结果相差2倍多。用不同稀释浓度的三氯乙酸终止液，在高浓度时，不同浓度的三氯乙酸终止液得到的结果差别很大，随着三氯乙酸浓度的降低，所测得的酶活不断升高；但是在低浓度时，不同浓度的三氯乙酸终止液

2、得到的结果差别不大。关键词：三氯乙酸；木瓜蛋白酶；酶活；酪氨酸StudyontheInfluenceoftheStopSolutionofTrichloroaceticAcidintheAssayofEnzymeActivityofPapainMOQi-hui，WEIXing-ming，LIHuai，LUTuo-fang，OUNa（BiologicalResearchInstitute，GuangxiAcademyofSciences，Nanning530007，China）Abstract：Thisexperimentstudi

3、estheinfluenceofdifferenttrichloroaceticacidstopsolutionintheassayofenzymeactivityofpapain.AccordingtotwoAssaymethods，theinfluencewithdifferenttrichloroaceticacidstopsolutionwasstudied.Theresultsindicatedthattheresultofonesolutionisthreetimesofthatofanothersolution.Th

4、erewasgreatdiscrepancyinresultswhenusinghighconcentrationtrichloroaceticacidstopsolutionofdifferentdilutedconcentration.Thelowertheconcentrationoftrichloroaceticacidis，thehighertheresultofassayis.Therewaslittlediscrepancyinresultsusinglowconcentrationtrichloroaceticac

5、idstopsolutionofdifferentdilutedconcentration.Keywords：trichloroaceticacid；papain；enzymeactivity；tyrosine中图分类号：TS207.3文献标志码：A文章编号：1007-7871（2015）01-0023-03木瓜蛋白酶是从番木瓜的乳汁中提取并经科学加工分国内国外两大类，国内的方法虽然有些差异，但差别而制成的一种植物蛋白酶，广泛应用于食品、饮料、调不是很大[11-14]。国外方法主要是美国药典（USP）32版[15]味品、医药、饲料

6、、化妆品[1-6]等行业，主要作为啤酒澄酶活测定方法，不同的研究者对不同测定方法造成检清剂使用[7]，在啤酒生产过程中，刚制成的啤酒内因含测结果的差异进行了研究分析[16，17]。本实验通过使用广西有少量蛋白质而显得浑浊，加入木瓜蛋白酶可以使啤酒科学院生物研究所的木瓜蛋白酶企业标准[8]和美国药典中的蛋白质水解成可以溶解的氨基酸，既丰富了营养成（USP）中的检测方法，尝试不同的三氯乙酸终止液进行分，提高啤酒质量，又可以使酒质澄清醇和。木瓜蛋白实验，研究三氯乙酸终止液对酶活测定结果产生的差酶水解效率的一个重要的衡量标准就是酶活的高低

7、，在异，并分析其产生的原因。生产和实验中，酶活的高低对酶的添加量影响很大，从而直接影响经济效益和实验结果，因此，酶活测定的准1材料与方法确性至关重要。蛋白酶酶活的测定方法比较多[8，9]，国标[10]采用的是紫外分光光度法和福林法，但国标并不适用于1.1材料与试剂动植物提取的蛋白酶。而紫外分光光度法是国内广大科三氯乙酸广东光华化学厂有限公司；木瓜蛋白酶研单位和企业最常使用的一种方法，具体测定方法主要广西科学院生物研究所提供；酪氨酸上海楷洋生物技收稿日期：2014-12-03作者简介：莫祺晖（1970—），男，助理研究员，研究方向为

8、酶制剂及食用菌技术开发与研究。E-mail：qihuimo88@163.com242015，Vol.18，No.1饮料工业基础研究※术有限公司；干酪素国药集团化学试剂有限公司；其一定的差异，但影响都不大，说明不同配方及不同浓度他试剂均为分析纯。的三