1型鸭甲肝病毒ly0801株vp1基因在鸭胚传代中的变异规律研究

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1、中国动物传染病学报2014,22(5):21-27ChineseJournalofAnimalInfectiousDiseases·研究论文·1型鸭甲肝病毒LY0801株VP1基因在鸭胚传代中的变异规律研究马明杰，郭翠平，焦玉祥，吕佳泓，孙振，张瑞华，陈君豪，谢之景，姜世金（山东农业大学动物医学院山东省动物生物工程与疾病防治重点实验室，泰安271018）摘要：为了解1型鸭甲肝病毒（DuckhepatitisAvirustype1）VP1基因在鸭胚传代中的变异规律，本研究将LY0801株DHAV-1在8鸭胚体内传代至30代，分别对1~

2、5、10、15、20、25、30代病毒进行VP1基因的克隆测序。各代次病毒分别以10copies/胚接种9日龄健康鸭胚，测定各组鸭胚的平均死亡时间和病毒在鸭胚尿囊液中的增殖拷贝数。结果表明：DHAV-1在鸭胚传代过程中，不同代次之间出现12个氨基酸的反复变异和同步变异，分别为R43M（K）、T48A、T101S、L169F、T180I、S181L、R183Q、E184A（K）、G187D、D193N、M213R、H219Y；在传代过程中，病毒致死鸭胚的时间逐渐延迟，但病毒在鸭胚内的增殖拷贝数未呈现稳定增长的趋势。关键词：1型鸭甲肝病

3、毒；VP1；变异；致弱中图分类号：S852.659.6文献标志码：A文章编号：1674-6422（2014）05-0021-07GENETICVARIATIONOFVP1GENEOFDUCKHEPATITISAVIRUSTYPE1LY0801STRAINDURINGREPEATEDPASSAGESINDUCKEMBRYOSMAMing-jie,GUOCui-ping,JIAOYu-xiang,LVJia-hong,SUNZhen,ZHANGRui-hua,CHENJun-hao,XIEZhi-jing,JIANGShi-jin(Sh

4、andongProvinceKeyLaboratoryofAnimalBiotechnologyandDiseaseControlandPrevention,CollegeofVeterinaryMedicine,ShandongAgriculturalUniversity,Taian271018,China)Abstract:TosurveythegeneticvariationofVP1geneofDuckhepatitisAvirustypeI(DHAV-I),DHAV-1LY0801isolatewascarried30se

5、rialpassagesinduckembryos.TheVP1geneofthefirsttofifth,tenth,fifteenth,twentieth,twenty-fifthandthirtiethpassageswas8amplifiedandsequencedrespectively.Withthedoseof10copiesperembryo,eachten9-day-oldhealthyduckembryoswereinoculatedwithdifferentpassagesofvirus,andthemeandeatht

6、imeofeachgroupandthevialcopiesinduckembryoallantoicfluidweredetected.Theresultsshowedthattherewere12aminoacidmutationsitesinVP1geneindifferentpassages,whichwereR43M(K),T48A,T101S,L169F,T180I,S181L,R183Q,E184A(K),G187D,D193N,M213RandH219Y.The12aminoacidmutationsappearedi

7、ndifferentpassagessimultaneouslyandrepeatedthemutationsinthefirst30passages.Inthepassagingprocess,themeandeathtimeofduckembryoswasincreasingwithincreasingpassagetimes,butthevirusproliferationinduckembryosdidnotshowasteadygrowthtrend.Keywords:DuckhepatitisAvirustyre1(DH

8、AV-1);VP1;mutation;attenuation收稿日期：2014-03-26基金项目：山东省科技发展计划项目（2010GNC10914）；山东省现代农业产业技术体系家禽创新团队（SDAIT-13-011-15）作者简介：