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1、中国科技论文在线http://www.paper.edu.cn#利用番茄红素提高细胞重编程效率的研究1,234**李荔，况二胜，柯琼（1.中山大学中山医学院药理学教研室，广东广州510080；52.哥伦比亚大学医学中心肺、过敏和重症监护内科肺生物学实验室，美国纽约10032；3.中山大学中山医学院人类病毒学研究所，广东广州510080；4.中山大学干细胞与组织工程中心教育部重点实验室，广东广州510080）摘要：目的：前期研究证实缝隙连接蛋白43（Connexin43，CX43）能促进细胞重编程效率，10而番茄红素被证实能促进CX43
2、的表达，本研究进一步探讨番茄红素是否能促进诱导多能干细胞的形成。方法：利用荧光定量PCR及Westernblot观察番茄红素对人成纤维细胞表达CX43的影响，利用碱性磷酸酶染色及TRA-1-60免疫组化染色的方式检测番茄红素对诱导多能干细胞形成效率的影响。结果：番茄红素能有效增加人皮肤成纤维细胞中CX43蛋白的表达，其表达量为对照组的2倍（10μM）。在细胞重编程过程中，番茄红素（10μM）实验15组AP阳性克隆数增加，克隆形成率约为对照组的2.8倍；TRA-1-60免疫组化染色显示TRA-1-60阳性克隆数提高至对照组的2.3倍。结
3、论：利用番茄红素可以促进诱导多能干细胞的形成效率，其作用机制可能与促进CX43的表达有关。关键词：诱导多能干细胞；番茄红素；细胞重编程；缝隙连接蛋白43中图分类号：R31820StudiesonthePromotionofCellReprogrammingbyLycopene1,234LILi,KUANGErsheng,KEQiong25(1.DepartmentofPharmacology,ZhongshanSchoolofMedicine,SunYat-SenUniversity,Guangzhou,510080;2.LungBi
4、ologyLaboratory,DepartmentofMedicine,DivisionofPulmonary,AllergyandCriticalCare,ColumbiaUniversityMedicalCenter,NewYork,NewYork,10032.;3.InstituteofHumanVirology,ZhongshanSchoolofMedicine,SunYat-SenUniversity,30Guangzhou,510080;4.KeyLaboratoryforStemCellsandTissueEngine
5、ering,MinistryofEducation,SunYat-SenUniversity,Guangzhou,510080)Abstract:Aim:Ourpreviousreportconfirmedthatconnexin43(CX43)isinvolvedinthegenerationofhiPSCs.LycopeneisprovedthatitcouldupregalatetheexpressionofCX43buttherolesof35lycopeneonreprogrammingprocessarestillunkn
6、own.Methods:RealtimePCRandwesternblotwereusedtoevaluatetheeffectoflycopeneontheexpressionofCX43inhumandermalfibroblasts(hDFs).TheeffectoflycopeneonthegenerationofiPSCswasdetectedbyalkalinephosphatase(AP)stainingandTRA-1-60staining.Results:TheexpressionofCX43wasupregulat
7、edinlycopenetreatinghDFsandtheCX43proteinlevelwas2foldsgreaterthancontrol.Whenthelycopenewasintroducted40togetherwiththeYamanakafactors(OCT4,SOX2,KLF4,cMYC-OSKM),itcanalsoenhancehumaninducedpluripotentstemcells(hiPSC)generationandweobtainedanapproximately2.8-foldand2.3-
8、foldincreasesinthereprogrammingefficiencywhencountingtheAPpositiveorTRA-1-60positivecolonies,respectively.Conc
