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时间:2021-12-12
《海洋普鲁兰短梗霉HN6.2菌株铁载体合成与调控的研究》由会员上传分享,免费在线阅读,更多相关内容在学术论文-天天文库。
1、研究生姓名叱论义絲丨位授予丨期士中国海洋大学博士学位论文海洋普鲁兰短梗霉菌株铁载体合成与调控的研究学位论文完成日期:指导教师龄:答辩委员会成员签字:中国海洋大学博士学位论文独创声明本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。据我所知,除了文中特别加以标注和致谢的地方外,论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果,也不包含未获得注:如没有其他需要特别声明的,本栏可空)或其他教育机构的学位或证书伸用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示谢意。学位论文作者签名签字日期:年日学位论文版权使用授权书
2、本学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定,有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和磁盘,允许论文被查阅和借阅。本人授权学校可以将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索,可以釆用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。同时授权中国科学技术信息研究所将本学位论文收录到《中国学位论文全文数据库》,并通过网络向社会公众提供信息服务。(保密的学位论文在解密后适用本授权书)学位论文作者签名:考导师签字:签字日期:必…年丨月日签字日期:知飞年丨月?日中国海洋大学博士学位论文海洋普鲁兰短梗霉菌株铁载体合成与调控的研究摘要普鲁兰短梗霉(菌株由海洋
3、环境中分离获得,为一株可高产异羟肟酸类铁载体的海洋酵母。在最优条件下,其铁载体产量最高可达到,在培养基中添加后该菌株铁载体的产量明显减少,该菌株所产铁载体对海洋鳗弧菌和海洋副溶血弧菌具有明显的抑菌活性。但是目前其他实验室还未在分子水平上对该菌株铁载体合成与调控机制进行研究。铁载体的合成途径起始于鸟氨酸羟基化,由鸟氨酸单加氧酶催化,形成基鸟氨酸,即铁载体的基本结构单元。数个该结构基本单元在非核糖体肽合成酶的催化下组装为铁载体,所以鸟氨酸单加氧酶催化该铁载体合成反应的第一步反应。为了研究该酵母菌铁载体合成和调控的功能基因,本研究构建了该菌株的基因敲除元件。该元件由启动
4、子,潮霉素磷酸转移酶基因基因和特定终止子序列(构成,将该元件命名为。在该元件的两端连接上来自该菌株的蛋白酶基因’端同源重组片段(’和’端同源重组片段(’后得到碱性蛋白酶基因敲除载体,该敲除载体转化到菌株细胞后,获得的敲除菌株碱性蛋白酶活性大幅下降,说明基因敲除元件在菌株中可以正常起作用,敲除载体构建成功。在本研究中,通过反向和的方法克隆了
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