浙贝母提取工艺的优化选择

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1、浙贝母提取工艺的优化选择浙贝母提取工艺的优化选择更新日期:2009-07-29点击:苏碧茹* 程艳阳 陈斌摘 要 以总生物碱含量为指标,采用正交试验法考察提取溶媒、溶媒浓度、药材处理方法、提取次数等因素对总生物碱提取效果的影响。结果表明,浙贝母的最佳提取工艺条件为以95%乙醇提取2次,每次1h,整粒提取,溶媒量6倍,药材不需碱处理。关键词 浙贝母 总生物碱 提取工艺 正交试验  浙贝母的功效是清热润肺、化痰止咳,其主要有效成分贝母碱具有化痰镇咳的作用〔1〕。为了制定科学合理的提取工艺,保证有效成分的提取效率,特以总生物碱含量为指标,用正交试验法作最佳提取工艺

2、的研究。1 仪器与试药  华里安CARY-1型紫外分光光度计,浙贝母药材购自广州市药材公司,贝母素甲对照品由中国药品生物制品检定所提供,所用试剂均为分析纯。2 方法与结果2.1 样品的提取:取浙贝母药材8份,每份30g,按表1条件进行药材处理及提取,测定提取液的最后体积,作为供试品溶液。2.2 总生物碱的测定〔2〕2.2.1 标准曲线制备:精密称取贝母素甲对照品5.1mg,置50mL容量瓶中,加氯仿溶解至刻度,摇匀,作为对照品溶液。分别精密吸取5、1.0、1.5、2.0、2.5、3.0mL至25mL容量瓶中,加缓冲液(pH=5.0)5mL,溴麝香草酚蓝试液2

3、mL,摇匀,再加氯仿至刻度,充分摇匀,移入分液漏斗中,放置分层,取下层液作测试液。以氯仿同法操作作空白对照,先用350~450nm波长进行扫描,得λmax为410nm,测定吸收度值,得回归方程为:A=1.9595C+0.0122,r=0.9992。2.2.2 样品的测定:分别精密吸取供试品溶液2mL,置25mL容量瓶中,加缓冲液(pH=5.0)5mL,溴麝香草酚蓝试液2mL,摇匀,再加氯仿至刻度,充分摇匀,移入分液漏斗中,放置分层,取下层液比色测定。另取蒸馏水2.0mL同法操作,作为空白溶液。在410nm波长处测定吸收度值,并按回归方程计算样品液中总生物碱含

4、量。2.3 正交试验及结果:根据有关资料及经验,拟定7个因素,每个因素选择2个水平(表1),按L8(27)正交设计表对总生物碱进行提取和测定,结果见表2,方差分析见表3。表1 因素水平水平溶媒A浓度B(%)药材处理C提取次数D提取时间E(h)粒度F溶媒量G1乙醇6010%Na2CO3浸30min21碎粒6倍2水95不处理32整粒9倍表2 试验方案与结果试验号ABC因素DEFG试验指标总生物碱含量(%)111111110.163211122220.240312211220.280412222110.310521212120.148621221210.12872

5、2112210.095822121120.126Ⅰ0.9930.6790.6240.6060.6970.7470.696 Ⅱ0.4970.8110.8660.8840.7930.7430.794T=1.49R0.4960.1320.2420.1100.0960.0040.898 表3 方差分析方差来源偏差平方和自由度均方F值PA0.030710.030774.70<0.01B4.375×10-314.375×10-310.63<0.05C7.325×10-317.325×10-517.81<0.05D1.738×10-311.738×10-34.22>0.0

6、5E3.25×10-513.25×10-50.079>0.05F2.0×10-612.0×10-60.0049>0.05G1.2×10-311.2×10-32.91>0.05e(误差)1.235×10-331.235×10-3   F0.01(1,3)=34.11 F0.05(1,3)=10.133 小结3.1 方差分析表明,提取溶媒对贝母碱的提取效果影响极显著,溶媒浓度、药材处理次之,提取时间、提取次数、粒度、溶媒量对结果几乎无影响。3.2 从表2结果表明,提取效果最佳的第4号(A1B2C2D2E1F1G1),即以95%乙醇提取3次,每次2h,碎粒提取,溶

7、媒量6倍,药材不需10%Na2CO3处理。计算选优为A1B2C2D2E2F1G2,即除溶媒9倍外,其余相同,但从表3看,溶媒量等对结果几乎无影响,可任取其一水平,从节约成本考虑,选择最佳提取工艺为A1B2C2D1E1F2G1,即以95%乙醇提取2次,每次1h,整粒提取,溶媒量6倍,药材不需10%Na2CO3处理。*Address:SuBiru,GuangzhouNo.1FactoryofChineseMateiaMedica,Guangzhou作者单位:苏碧茹 程艳阳 陈斌广州中药一厂(510130)参考文献 [1] 中国医学科学院药物研究所等编.中药志(Ⅰ

8、).北京:人民卫生出版社,1982:93 [2] 刘

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