白色链霉菌pl3-6菌株产聚赖氨酸发酵条件研究

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1、2008届毕业生毕业论文题目:白色链霉菌PL3-6菌株产聚赖氨酸发酵条件研究院系名称：生物工程专业班级：生物工程0402班学生姓名：赵爱霞学号：20044850427指导教师：惠明、田青教师职称：副教授、助教2008年06月01日III摘要ε-聚赖氨酸(ε-Poly-L-Lysine)是由微生物发酵合成的一种由赖氨酸单体通过ε-酞胺键形成的多肤。ε-PL具有优良的抑菌作用，对革兰氏阳性菌和阴性菌、酵母和一些病毒都有抑制作用，而且兼有水溶性好、热稳定性高等特点。采用正交实验对筛选的一株白色链霉菌StreptomycesalbulusPL3-6发酵产ε-聚赖氨酸(ε-

2、PL)的培养基成分进行了优化。结果表明，该菌株产ε-PL的优化培养基为:葡萄糖3.0g·L-1、酵母粉0.5g·L-1、(NH4)2SO41.2g·L-1、KH2PO40.20g·L-1、K2HPO40.12g·L-1、MgSO4·7H2O0.05g·L-1、FeSO4·7H2O0.003g·L-1、ZnSO4·7H2O0.008g·L-1。在优化培养基下，ε-PL摇瓶产量达到4.05g·L-1，比优化前提高了25%。采用D152弱酸性阳离子交换树脂(H型)对发酵法生产的ε-聚赖氨酸进行了分离提取。参考文献设计了合理的工艺流程。离心分离发酵(pH3.2)，调节滤液

3、的pH值到8.5，过滤除去沉淀。滤液通过D152离子交换柱(H型)，用水和0.2N醋酸洗涤，用0.1N的盐酸洗脱。用1N的NaOH调节洗脱液的pH值到6.5，加入活性炭脱色后浓缩到小体积。加入乙醇和乙醚的混合物(体积比2:1)后，析出白色晶体。关键词：ε-聚赖氨酸白色链霉菌发酵条件提取离子交换IIITitleThestudyonfermentconditionofStreptomycesalbulusPL3-6producedε-PLAbstractε-Poly-L-Lysineiscomprisedoflysinelinkedbyamidebondthrough

4、microbialfermentation.IthasexcellentantibacterialactivityagainstGram-positiveandGram-negativebacteria,yeastandsomekindsofviruses.Inadditionalε-Poly-L-Lysineissolubleandattractiveheatstable.ThefermentationmediumofStreptomycesalbulusproducingε-poly-L-Lysinewasoptimizedbyorthogonalexperi

5、ments.Theoptimalmediumconsistedof3.0g·L-1glucose,0.5g·L-1yeastextract,1.2g·L-1(NH4)2SO4，0.20g·L-1KH2PO4,0.12g·L-1K2HPO4,0.05g·L-1MgSO4·7H2O,0.003g·L-1FeSO4·7H2Oand0.008g·L-1ZnSO4·7H2O.Theyieldofε-PLreached4.05g·L-1withoptimalmedium,whichincreased25%comparedtoinitialmedium.Theseparatio

6、nandextractionofε-Poly-L-Lysinefromfermentationliquidbyusingweakacidanion-exchangeresinD152.Theculturebroth(pH3.2)wasfilteredandthefiltratewasadjustedtopH8.5.Then,theprecipitateformedwasremovedbyfiltration.Thefiltratewasappliedonacolumnofweakacidanion-exchangeresinD152(H+-from)andwash

7、edwith0.2Naceticacidandwater,successively.Thesubstancewaselutedwith0.1Nhydrochloricacid.Theeluatewasneutralizedwith1Nsodiumhydroxideanddecolorizedwithactivecharcoal,andthenevaporatedtoasmallvolume.Thesubstancewasprecipitatedasawhitepowderbyadditionofanethanolandether(2:1)mixture.Keywo

8、rds:ε