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时间:2018-01-19
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1、Aglent1100型液相色谱仪操作规程Aglent1100型液相色谱仪操作规程1.目的:建立安捷伦1100型高效液相色谱仪的标准操作规程,确保操作的准确与可靠。2.依据:安捷伦1100型高效液相色谱仪使用说明书。3.范围:适用于安捷伦1100型高效液相色谱仪的操作管理。4.责任:仪器使用者对本规程的实施负责,QC主任负责监督该操作规程的正确执行。5.正文:5.1.操作步骤5.1.1.打开计算机,进入windows英文操作系统,并运行BootpSever程序。5.1.2.开启液相色谱仪主机5.1.3.依次打开1100LC自动进样器、泵及所需要使用的检测器等各模块的电源开关
2、。待各模块自检完毕后,双击InstrumentOnline图标,色谱工作站自动与1100LC接通,并出现Configuration对话框,选中左测栏内需用的模块图标,单击add,便可进入右测的使用状态;选中右测栏内不需用模块的图标,单击remove,便可使之进入左测栏内的不使用状态。5.1.4.把所需要的流动相经过过滤后放入溶剂瓶中。5.1.5.单击pump图标,出现参数设定菜单,选中Setuppump,设置流速Flow为5.0ml/min、StopTime、以及流动相的比例,逆时针打开Purge阀。单击PumpControl选项,选中on,单击OK,开始脱气至通道无气泡
3、为止。5.1.6.开启泵的在线洗脱,用10%异丙醇溶液清洗,必要时从清洗液的流出管口用注射器抽一下,使得其流速为3~5滴/分钟。5.1.7.单击PumpControl选中off,关泵,顺时针旋转关闭Purge阀。5.1.8.单击Pump图标,单击SetupPump选项,进入pump编辑画面,设流速、StopTime(要超过组分的保留时间)、以及流动相在各个通道的比例、最高柱压和最低柱压等,单击“OK”。5.1.9.单击泵下面的图标,输入各个溶剂瓶内的实际体积(SolventBottlesFilling),以及PreventAnalysisifLevelFallsBelow
4、Liter,单击“OK”。5.2.数据采集方法编辑:5.2.1.编辑完整的方法:从“Method”菜单中选择“Editentiremethod”项,自动弹出各个需要编辑的项目。5.2.2.自动进样器项目:选择InjectionWithNeedleWash、InjectionVolume以及清洗液所在瓶子的编号WashVial等,单击“OK”。5.2.3.泵项目:见5.1.8.和5.1.9.内容。5.2.4.柱项目:设置柱温箱的温度或程序升温参数等。5.2.5.检测器的项目:若使用紫外检测器,则需要编辑检测波长等参数;若使用荧光检测器,则需要编辑激发波长和发射波长等参数等,
5、单击“OK”。5.2.6.编辑全部完成后,单击File,并从菜单中选择Savemethodas……,给所编辑的方法命名并保存之。5.2.7.单击Instrument,并从菜单中选择SystemOn,开始运行系统,此时,将要使用的体系的图标均为绿色。5.3.进样5.3.1.将已经处理好的盛放有样品待测溶液的小瓶放入样品盘中,注意小瓶口处的隔膜垫一定要朝下对着待测溶液放置,瓶口盖子不可旋得太紧。5.3.2.单个进样5.3.2.1.单击单个瓶子的图标,弹出对话框,依次选择自动进样、前缀(Prefix)、记数(Counter)通常从1开始、样品瓶在样品盘中的位置号Location
6、Vial等参数,编好后,点击RunMethod,仪器便开始自动操作。5.3.2.2.点击?→图标,可以对看到色谱吸收曲线的绘制过程,通常前两针进样所得到的色谱吸收曲线是不太可靠的的,因为仪器此时并未完全进入平稳状态;可以用标样进行重复操作直至得到可靠的色谱吸收曲线,然后在进行多样品连续进样的编程。5.3.3.多个进样5.3.3.1.单击三个瓶子的图标,弹出对话框;点击其下面单个瓶子的图标,选择SequenceTable,依次编辑顺序号、瓶号Vial、样品名称SampleName、方法名称MethodName、进样次数、进样体积等等参数,检查无误后,点击RunMethod,
7、仪器便开始自动运行已经编制好的操作Sequence。5.4.关机5.4.1.分析完毕后,单击仪器STOP按钮停止采集运行,依次退出当前窗口,听见“嘀”声后,表明仪器已经退出数据采集工作。5.4.2.单击泵图标,调整有关参数,用适当的溶剂清洗色谱系统;溶剂的选择、置换与混合请参考下表。不可互相置换的溶剂组可能发生的问题应采取的措施水与低极性溶剂(正己烷、氯仿等)乳浊、分层先用异丙醇或丙酮置换缓冲溶液与有机溶剂(甲醇、乙腈、四氢呋喃)析出沉淀先用水置换稀硝酸和乙醇发生反应先用水置换各个通道用所选择的溶剂冲洗干净后(每个通道冲洗10
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