最新实验五植物细胞骨架观察课程教学讲义PPT.ppt

《最新实验五植物细胞骨架观察课程教学讲义PPT.ppt》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在教育资源-天天文库。

1、实验五植物细胞骨架观察课程弹性软骨胞间连丝一、目的与要求1、了解植物细胞骨架制片方法和其成分显示的原理2、掌握考马斯亮蓝R250染色方法3、观察细胞骨架在细胞中的分布情况二、原理细胞骨架指细胞质中纵横交错的纤维网络结构。可分为微管、微丝和中间纤维，它对细胞形态维持、细胞生长、运动、分裂、分化和物质的运输等起着重要的作用。当细胞用适当浓度的Triton-X-100处理时，可将质膜中和细胞内蛋白质溶解，而骨架系统的蛋白质不被破坏，经固定和考马斯亮蓝R250染色后，可使骨架蛋白着色而被显示。三、材料、

2、器材与试剂1、材料新鲜洋葱鳞茎的内表皮2、器材滴管、载玻片、盖玻片、镊子、剪刀、10mL小烧杯、显微镜、恒温水浴锅等3、试剂1）M－缓冲液：咪唑（pH6.7）50mM、MgCl20.5mM、KCl50mM、EGTA[乙二醇双（α－氨基乙基）醚四乙酸]1mM、巯基乙醇或DTT（二硫苏糖醇）1mM、EDTA0.1mM2）磷酸缓冲液（PBS）3）1%Triton-X-100（用M－缓冲液配制）4）0.2%考马斯亮蓝R250：考马斯亮蓝R2500.2g、甲醇46.5mL、冰醋酸7.0mL、蒸馏水46.5

3、mL5)植物细胞固定液：5ml38%甲醛、5ml冰醋酸、90ml70%酒精和5ml甘油四、实验步骤1、取材：内表皮约0.5cm2，放在盛有PBS缓冲液的小烧杯中，浸泡处理10min。2、抽提：吸去PBS缓冲液，取2ml1%Triton-100入小烧杯中，置于37℃恒温水浴锅中保温30min。3、冲洗：吸去1%Triton-X-100，用M缓冲液轻洗三次，每次5min。4、固定：加植物固定液2ml固定30min5、冲洗：弃去固定液后，用PBS缓冲液清洗三次，每次1-2min6、染色：吸去PBS，滴

4、1滴0.2考马斯亮蓝R250染液染色5min7、制片：倒去染液，用蒸馏水清洗三次，将标本平铺在载玻片上，再盖上盖玻片。8、观察五、实验结果绘出洋葱鳞叶内表皮细胞内细胞质骨架的分布图。六、讨论1．对实验结果的分析2．实验中的注意事项和关键步骤七、实验报告与值日短语的类型短语练习汉字词短语句子……山、人、非、看、美……美好、微笑、吃、巧克力……美好的微笑、吃晚饭……（一个音节为一个汉字，最小语言单位）（有意义的能独立运用的最小的语言单位）（词和词组合而成的语言单位，又称词组，是构成句子的基础，大多数

5、短语加上一定的语气语调就能成为句子。）短语的五种基本类型1、并列关系——城市和乡村并列短语2、修饰关系——新老师偏正短语3、支配关系——收割庄稼动宾短语4、补充关系——讲清楚补充短语5、陈述关系——节目好看主谓短语请你各续写两个短语并列短语词和词之间没有轻重主次之分，是平等的联合结构：名＋名如：报纸杂志今天或明天结构：动＋动如：调查研究讨论并通过类型结构：形＋形如：雄伟壮丽庄严肃穆并列短语词和词之间没有轻重主次之分，是平等的联合。结构：代＋代如：我和他这样那样结构：数量＋数量如：四面八方千秋万代

6、三斤五两类型特点：并列短语一般要求词性相同，前后可以互换位置偏正短语前偏后正：以后面的词语为中心，前面的词语对后面的词语起修饰、限制作用结构：定＋中（名、代）如：（祖国）大地（一个）顾客（可爱的）人（我的）老师结构：状＋中（动、形）如：[很]好看[独立]思考[更加]坚强[完全]相信特点：“的”是定语的标志；“地”是状语的标志。主谓短语表示陈述与被陈述的关系结构：名词（代词）+动词（形容词）主语可以回答谓语“谁”、“什么”；谓语可以回答主语“怎么样”。如：觉悟提高思想解放阳光灿烂心情舒畅特殊主谓短

7、语：名词做谓语。如：今天星期三、明天国庆节、他中等身材动宾短语前面是动词，后面是动词支配的对象。结构：动词＋宾语宾语是回答动词“谁”、“什么”、“哪儿”的。如：敬畏生命放下包袱丢下它发展生产进行斗争骗取信任恢复平静爱热闹下决心有幽默感像珍珠夸奖我补充短语以前面的动词或形容词为中心，后面的词语对其起补充作用动补短语：动+补如：看<清楚>去<一趟>拿<起来>打量<一番>吓<跑>盛<满>形补短语：形+补如：好<极了>热<死了>强得<多>暗得<很>冻得<麻木>特点：结构助词“得”是补语的标志练习指出下列

8、短语的结构风俗习惯（）　变化规律（）历史悠久（）　整修一新（）废寝忘食（）　　前程远大（）襟怀坦白（）　挥手之间（）销售计划（）　色彩缤纷（）风和日丽（）　　激动不已（）禁止吸烟（）　　辛勤耕耘（）并列　偏正主谓　后补并列　主谓主谓　　偏正偏正主谓并列　　后补动宾偏正练习比较判断短语类型经济发展（）　　历史悠久（）发展经济（）　悠久历史（）描写景物（）　市场繁荣（）景物描写（）　市场的繁荣（）表达见解（）　我的弟弟（）表达的见解（）我和弟弟（）我国文学（）　小说散文（）我国的文学（）　小说和散文