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时间:2020-07-06
《植物细胞骨架的观察.doc》由会员上传分享,免费在线阅读,更多相关内容在教育资源-天天文库。
1、实验六植物细胞骨架的光学显微镜观察一、实验目的:掌握植物细胞骨架处理及染色方法。二、实验原理:用适当浓度的TritonX-100处理时,可将细胞内蛋白质破坏,但细胞骨架系统的蛋白质却被保存,后者用考马斯亮兰R250染色,可在光学显微镜下观察到细胞骨架的网状结构。三、实验试剂:1、M-缓冲液;2、pH6.8磷酸缓冲液;3、1%TritonX-100,用M-缓冲液配制;4、0.2%考马斯亮兰R250;5、3%戊二醛,用pH6.8磷酸缓冲液;四、实验步骤:1、撕取洋葱鳞茎内表皮细胞(约1cm2大小若干片)置于装有pH6.8磷
2、酸缓冲液的50ml烧杯中,使其下沉;2、吸去pH6.8磷酸缓冲液,用1%TritonX-100处理20min;3、吸去1%TritonX-100,用M-缓冲液洗三次,每次8min;4、3%戊二醛固定30min;5、pH6.8磷酸缓冲液洗三次,每次8min;6、0.2%考马斯亮兰R250染色20min;7、用蒸馏水洗1-2次,将内表皮细胞平铺子载玻片上,加盖玻片,于显微镜下观察。五、实验作业:1、绘制你所观察到的植物细胞骨架图象;2、戊二醛、考马斯亮兰R250、TritonX-100是什么?在本实验中各起什么作用?
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