最新DNA的粗提取与鉴定实验教学讲义ppt课件.ppt

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1、DNA的粗提取与鉴定实验课题背景通过制作DNA的双螺旋结构模型，模拟DNA的复制，绘制DNA指导蛋白质的合成过程。同学们对DNA有了不少的了解。请回答：DNA的基本组成单位和空间结构特点是什么？请设想：如果你要对DNA进行粗提取和鉴定，应该考虑哪些问题？1.提取：原理（提取的依据是什么？）---操作（如何设计正确的实验步骤？）---提纯（如何提高DNA的纯度？）2.鉴定：原理（鉴定的依据是什么？）---操作（如何设计正确的实验步骤？）---现象（通过什么现象能够说明问题？）一、提取DNA的方法2.提取破碎细胞，获取含DNA的滤液思考：为

2、什么在提取洋葱的DNA时在切碎的洋葱中要加入一定的洗涤剂和食盐？洗涤剂是一些离子去污剂，能溶解细胞膜，有利于DNA的释放；食盐的主要成分是NaCl，有利于DNA的溶解。3.提纯去除滤液中的杂质认真研究教材P55去除杂质的三个方案，对比三个方案的设计原理有什么不同？方案一是利用DNA在不同浓度的NaCl溶液中溶解度的不同，通过控制NaCl溶液的浓度去除杂质；方案二是利用蛋白酶分解杂质蛋白，从而使提取的DNA与蛋白质分开；方案三利用的是DNA和蛋白质对高温耐受性的不同，从而使蛋白质变性，与DNA分离。嫩肉粉，又称松肉粉。这是一种能使动物性原

3、料软嫩滑润，同时又不损伤肌纤维弹性的佐助料。嫩肉粉呈白色粉末状，为纯天然制品，它的主要成分是从番木瓜中提取的疏松剂——木瓜蛋白酶，它能将动物类原料结缔组织、肌纤维中的胶原蛋白及弹性蛋白适当分解，使部分氨基酸之间的连接键发生断裂，从而破坏它们的分子结构，大大提高原料肉的嫩度，并使其风味得到改善。小资料4.析出析出DNA将处理后的溶液过滤，加入与滤液等体积、冷却的酒精溶液（体积分数为95%），静置2—3min，溶液中会出现白色丝状物，即粗提到的DNA。用玻璃棒沿一个方向搅拌，卷起丝状物，用滤纸吸去上面的水分。5.鉴定鉴定DNA取两支20mL

4、的试管，各加入物质的量浓度为2mol/L的NaCl溶液5mL，将丝状物放入其中一支试管中，用玻璃棒搅拌，使丝状物溶解。然后，向两支试管中各加入4mL的二苯胺试剂。混合均匀后，将试管置于沸水中加热5min，待试管冷却后，比较两支试管的溶液颜色的变化，看看溶解有DNA的溶液是否变蓝。思考：1.DNA鉴定采用了什么实验方法？2.鉴定DNA的方法，除了用二苯胺试剂外，还有什么方法？操作提示以血液为实验材料时，每100　mL血液中需要加入３g柠檬酸钠，防止血液凝固。采用植物材料时加入洗涤剂后，动作要轻缓、柔和，否则容易产生大量的泡沫，不利于后续步

5、骤的操作。二苯胺试剂要现配现用，否则会影响鉴定的效果。结果分析与评价1.你能分析出粗提取的DNA中可能含有哪些杂质吗？2.你认为从细胞中提取某种特定的蛋白质与提取DNA一样容易吗？提取蛋白质比提取DNA的难度大。这是因为，与DNA相比，蛋白质对温度、盐浓度、pH等条件要敏感得多，很容易失活；并且蛋白质的空间结构多种多样，理化性质各不相同，使得蛋白质的提取没有一种统一的方法，只能根据特定蛋白质的特性摸索提取的条件，设计特定的方法。提取DNA的第一步是材料的选取，其目的是一定要选取DNA含量较高的生物材料，否则会由于实验过程中或多或少的损失

6、而造成检测的困难；第二步是DNA的释放和溶解，这一步是实验成功与否的关键，要尽可能使细胞内的DNA全部溶解；第三步是DNA的纯化，即根据DNA的溶解特性、对酶及高温的耐受性的不同特性，最大限度地将DNA与杂质分开；最后一步是对DNA进行鉴定，这是对整个实验的结果的检测。3.请解释提取DNA的实验操作中主要步骤的目的。6开国大典自主学习合作探究1、通读课文说一说课文重点描写了哪一个场面？2、自读课文第一部分内容，找一找开国大典是在什么时间举行的？在哪里举行的？有哪些人参加？参加大典的总人数是多少？在书上标注出来3、课文中描写了群众从四面八

7、方汇集到天安门广场来参加开国大典，哪些语句给你留下的印象较深？为什么？（小组交流）4、快速浏览课文第二部分内容，读一读自己喜欢的自然段，说一说自己喜欢的理由。（小组交流）5、重点读一读课文第7段和第13段，说一说你的体会。（小组交流）6、最后一部分中的“红流”指的是什么？“光明充满了整个北京城”有什么寓意呢？（小组交流）达标测学巩固练习1、根据词意写词语。（1）一个新的国家建立时举行的隆重的典礼（　　　）(2)恭敬而庄严地站着。　　　　　　　（　　　）(3)比喻力量强，声势大。　　　　　　　（）(4)恭敬地看。　　　　　　　　　　　　（

8、　　　）2.缩句。（1）．受检阅的部队在《中国人民解放军进行曲》的乐曲声中，由东往西，缓缓进场。(2)．他用强有力的语调向全世界发出新中国的声音(3)．毛主席在群众一阵又一阵的掌声中宣读中央人民政府的公告。