DNA粗提取与鉴定.ppt

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1、专题五DNA和蛋白质技术课题1DNA的粗提取与鉴定一、基础知识1、DNA的溶解性高浓度NaCl溶液，DNA溶解度高,过滤除去不溶的杂质。0.14mol/LNaCl溶液，DNA溶解度低，析出DNA，过滤除去可溶的杂质。DNA不溶于酒精细胞中的某些蛋白质则溶于酒精(1)酶(2)高温2、DNA的耐受性蛋白酶水解蛋白质而不会对DNA产生影响。大多数蛋白质60-80℃变性，DNA在80℃以上才会变性。瓦解细胞膜，但对DNA无影响。(3)洗涤剂一、基础知识在沸水浴条件下，DNA遇二苯胺呈现蓝色。3、DNA的显色反应DNA遇甲基绿呈现绿色。一、基

2、础知识二、实验材料动物材料：鸡血三、实验步骤1、破碎细胞，获取含DNA的滤液植物材料：菜花吸水涨破细胞壁：研磨细胞膜：洗涤剂滤液中可能含有哪些细胞成分？怎样进一步提取滤液中的DNA？三、实验步骤2、去除滤液中的杂质利用DNA在NaCl溶液中溶解度。利用酶的专一性。利用温度的耐受性。三、实验步骤3、DNA的析出怎样进一步纯化提取出的DNA？纯的DNA应该是什么颜色？利用DNA不能溶于酒精溶液，纯化出白色丝状的DNA。三、实验步骤4、DNA的鉴定甲乙高浓度NaCl溶液DNA粗提取物二苯胺试剂现象步骤试管号amlaml适量——bmlbml

3、沸水浴加热溶液变蓝溶液不变色现用现配试验管对照管1.两次向盛有鸡血的烧杯中加入蒸馏水的作用是（）A.稀释血液、冲洗样品B.使血细胞破裂、降低NaCl浓度使DNA析出C.使血细胞破裂、增大DNA溶解量D.使血细胞破裂、提取含杂质较少的DNA2.出现白色丝状物时，用玻璃棒搅拌要沿一个方向轻轻搅拌是为了（）A.省力B.加快蛋白质的析出C.加大DNA的溶解度D.防止DNA结构被破坏3.加入酒精的目的是（）A.溶解DNAB.除去DNA中所有杂质C.析出DNAD.稀释溶液降低浓度4.下列有关实验原理的叙述正确的是（）A.DNA随NaCl溶液浓度

4、的降低而溶解度减小B.提取较纯净的DNA利用了其不溶于酒精的特点C.DNA是大分子有机物，不溶于水而溶于所有有机溶剂D.在沸水浴中，DNA遇二苯胺会出现紫色反应DCBB