dna的粗提取与鉴定

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1、DNA的粗提取与鉴定2005-3-29[教学目标]初步掌握DNA粗提取和鉴定的方法、观察提取出来的DNA物质[教学重、难点]DNA粗提取和鉴定的方法[知识整理]Ⅰ基础知识一.目的要求:学会DNA的粗提取和鉴定的方法,观察提取出来的DNA。二.材料用具:三.实验原理:1.2.3.四.方法步骤:实验步骤操作方法实验原理课前鸡血细胞液DNA的粗提取提取血细胞核物质溶解核内的DNA析出DNA黏稠物滤取含DNA的黏稠物DNA的黏稠物再溶解过滤含DNA的氯化钠溶液提取含杂质较少的DNA。DNA的鉴定。五.讨论:1

2、.提取鸡血中的DNA时,为什么要除去血液中的上清夜?2.步骤1和步骤3中都需要加入蒸馏水,两次加入的作用相同吗?为什么?3.DNA的直径约为2nm,实验中出现的丝状物的粗细是否表示一个DNA分子直径的大小?4.实验中有3次过滤,作用及使用的纱布层数有何区别?5.实验中有6次搅拌,搅拌时应注意些什么?6.实验中两次使用蒸馏水的目的分别是什么?7.实验中有3次加NaCl溶液,目的分别是什么?8.影响实验效果的因素有哪些?9.盛放鸡血细胞液的容器和实验中的烧杯和试管最好也是塑料制的原因是什么?Ⅱ.例题解析:

3、1.在制备鸡血细胞液的过程中,加入柠檬酸钠的目的是A.防止凝血B.加快DNA析出C.加快DNA溶解D.加快凝血2.下列操作中,对DNA的提取量影响较小的是A.使鸡血细胞在蒸馏水中充分破裂,放出DNA等核物质B.搅拌时,要用玻璃棒沿一个方向轻缓搅动C.在析出DNA黏稠物时,要缓缓加蒸馏水,直至溶液中黏稠物不再增加D.在用酒精沉淀DNA时,要使用冷酒精,甚至再将混合液放入冰箱中冷却3.关于DNA的粗提取的实验材料的选择,也经过了多次实验效果的比较,最终选择鸡血做实验材料的原因是什么?请据图回答问题:(1)

4、鸡血细胞中红细胞__________________,家鸡属于鸟类,新陈代谢旺盛,因而血液中_______________细胞数目较多,可以提供丰富的___________________。(2)实验前由老师制备血细胞液供同学们做实验材料,而不用鸡全血,主要原因是_______________________。(3)生活在牧区的人们,采集牛、羊、马血比较方便,若他们按实验要求完成实验步骤后,结果是_______________________________,这是因为这些动物和人一样,________

5、________________。但若改用动物肝脏做实验材料,实验能顺利进行。这是因为_______________________。(4)若选用动物肝脏做实验材料,在提取之前,最好增加___________________程序,使组织细胞更易分离。Ⅲ.跟踪训练:一、选择题1.含有DNA的氯化钠(0.015mol/L)溶液中加入二苯胺试剂后,加热煮沸5min,溶液呈A.紫色B.蓝色C.砖红色D红色2.在“DNA的粗提取实验”中,有两次DNA的沉淀析出,其依据的原理是①DNA在物质的量浓度为0.14mo

6、l/L的氯化钠中的溶解度最低②DNA在冷却的体积分数为95%的酒精中能沉淀析出A.两次都是①B.两次都是②C.第一次是①,第二次是②D.第一次是②,第二次是①3.在向溶解DNA的NaCl溶液中不断加入蒸馏水的目的是A.加快溶解DNA的速度B.加快溶解杂质的速度C.减小DNA的溶解度,加快DNA析出D.减小杂质的溶解度,加快杂质的析出4.提取含杂质较少的DNA所用的溶液是A.体积分数为90%的冷却的酒精B.加热的、体积分数为95%的酒精C.体积分数为95%的冷却的酒精D.加热的、体积分数为90%的酒精5

7、.DNA的粗提取和鉴定实验,与下列哪项原理无关A.DNA在0.14mol/LNaCl溶液中的溶解度最低B.DNA易被龙胆紫染成紫色C.在DNA溶液中加入二苯胺,加热后产生蓝色D.加入95%的冷酒精,DNA会从溶液中析出6.下列图示中能反映DNA溶解度与NaCI溶液浓度之间关系的是7.甲、乙、丙三支试管分别盛有0.1%、o.9%、2%的NaCl各10mL。随后都加入抗凝剂和lmL鸡血,15分钟后离心处理。在它们的上清液中含有血红蛋白的是A.甲B.乙C.丙D.甲、乙、和丙8.有人将猪血取出后,经过滤,获得

8、猪血细胞液,经过一系列实验步骤后,发现实验效果与下列哪类动物相同A.两栖类B.鱼类C.鸟类D.哺乳类9.在下列物质中,具有和蛋白水解酶相似作用的物质是A.蒸馏水B.NaCl溶液C.NaOH溶液D.盐酸10.从鸡血细胞中提取DNA所用的提取液是A.NaCl溶液B.酒精溶液C.二苯胺D.柠檬酸钠11.DNA不溶于下列何种溶液A.NaCl溶液B.酒精溶液C.KCl溶液D.MgCl2溶液12.在DNA的粗提取过程中,初步析出DNA和提取较纯净的DNA所用的药品的

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