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1、土霉素片微生物验证论文【论文关键词】土霉素片;微生物限度检查法【论文摘要】目的:建立土霉素片的微生物限度检查方法。方法:采用薄膜过滤法对土霉素片处理后,分别进行细菌、霉菌及酵母菌计数方法的验证。结果:金黄色葡萄球菌和白色念珠菌的回收率均大于70%。结论:土霉素片采用薄膜过滤法检查微生物限度方法成立。TerramycinpiecemicroorganisminspectionmethodconfirmationWangYanningGuoLingbo【Abstract】Objective:Establishmentterramycinpiecemicr
2、oorganismlimitinspectionmethod.Method:Usesthethinfilmtofilterthelawafterterramycinpieceprocessing,separatelycarriesonthebacterium,themoldandthesaccharomycetescountsthemethodconfirmation.Result:Thegoldenyellowstaphylococcusandthewhiterosaryfungusreturns-ratioisbiggerthan70%.Concl
3、usion:Theterramycinpieceusesthethinfilmtofilterthelawinspectionmicroorganismlimitmethodtobetenable.【Keywords】Terramycinpiece;Microorganismlimitinspectionmethod土霉素是四环素类抗生素,能特异性地与细菌核糖体30S亚基的A位结合,抑制肽链的增长和影响细菌蛋白质的合成,对细菌有广谱抑菌作用。因此其微生物限度检查不能用平皿法,而应采用薄膜过滤法消除其抑菌作用后再检查。1材料1.1仪器:HWS-250型
4、恒温恒湿箱(天津苏瑞科技开发有限公司),集菌仪(杭州泰林生物技术设备有限公司),薄膜(孔径0.22um),康氏振荡器。1.2试剂:玫瑰红钠琼脂培养基,营养琼脂培养基,胆盐乳糖增菌培养基,MUG培养基,甘露醇氯化钠琼脂培养基等,均由中国药品生物制品检定所提供。41.3菌种:阳性对照菌:金黄色葡萄球菌(验证细菌)、白色念珠菌(验证酵母菌、霉菌);阴性对照:金黄色葡萄球菌(验证大肠埃希菌)。所用菌种均由中国药品生物制品检定所提供;稀释剂及冲洗剂为pH7.0氯化钠-蛋白胨缓冲液。1.4样品:土霉素片[0.25g(25万单位)],厂家为河南华利药业有限责任公司,
5、批号为07070601。2方法与结果2.1细菌、霉菌、酵母菌检查方法验证。2.1.1细菌检测方法验证。2.1.1.1试验组:取供试品10g,加入pH7.0氯化钠-蛋白胨缓冲液,于康氏振荡器上振摇10分钟,使片分散,500转、分离心后,分离上清液作为供试液。取上述供试液10ml,加入100ml稀释剂中,薄膜过滤,用冲洗液冲洗2次,每次100ml,第3次冲洗液中加入金黄色葡萄球菌菌悬液0.5ml,薄膜过滤,取出滤膜,面朝上贴于营养琼脂平皿上,35℃培养48小时,计数。2.1.1.2菌液组:取金黄色葡萄球菌菌悬液0.5ml,直接接种于营养琼脂平皿上,35℃培
6、养48小时,计数。2.1.1.3供试品对照组:取上述供试液10ml,加入100ml稀释剂中,薄膜过滤,用冲洗液冲洗3次,每次100ml,取出滤膜,面朝上贴于营养琼脂平皿上,35℃培养48小时,计数。2.1.1.4稀释剂对照组:取稀释液10ml,薄膜过滤,用冲洗液冲洗2次,每次100ml,第3次冲洗液中加入0.5ml金黄色葡萄球菌菌悬液,薄膜过滤,取出滤膜,菌面朝上贴于营养琼脂平皿上,35℃培养48小时,计数。2.1.1.5上述试验连续做三次,结果如下:金黄色葡萄球菌计数后平均值:稀释剂对照组菌数:第一次47个,第二次53个,第三次49个;菌液组菌
7、数:第一次58个,第二次64个,第三次60个;试验组菌数:第一次45个,第二次54个,第三次46个;供试品对照组菌数:第一次0个,第二次0个,第三次0个。2.1.1.6计算金黄色葡萄球菌回收率。2.1.1.6.1稀释剂对照组的回收率:(稀释剂对照组的平均菌落数/菌液组的平均菌落数)×100%4第一次:47/58×100%=81.0%第二次:53/64×100%=82.8%第三次:49/60×100%=81.7%2.1.1.6.2试验组的回收率:[(试验组的平均菌落数-供试品对照组平均菌落数)/菌液组平均菌落数]×100%第一次:(45-0)
8、/58×100%=77.6%第二次:(54-0)/64×100%=84.4%第三次:(46
