DNA凝胶回收试剂盒.doc

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1、AxyPrep-96PCR清洁试剂盒本试剂盒适合从PCR、酶促反应、测序反应的96孔板中每孔反应液中提取多至8mgDNA（大于75bp），回收率为70-90%。纯化的DNA不含引物、酶蛋白、单核苷酸、荧光染料或放射性同位素标记的单核苷酸。一、试剂盒组成、贮存、稳定性说明书，耗材：96孔DNA制备板，96孔1.6ml深孔板，96孔V型底板。BufferPCR-A：DNA结合溶液。室温密闭贮存。若出现沉淀，应于65°C温浴溶解并冷却至室温后再使用。BufferW2concentrate：去盐液。使用前，

2、根据瓶上指定的体积加入乙醇，混合均匀，室温密闭贮存。可用100%乙醇或95%无水乙醇。Eluent：2.5mMTris-HCl，pH8.5。室温密闭贮存。二、注意事项1.将洗脱液或水加热至65°C，有利于提高洗脱效率。2.DNA分子呈酸性，建议在2.5mMTris-HCl，pH8.5洗脱液中保存。三、操作步骤用户可以选择负压法或离心法。A.负压法1A．正确连接负压装置，将96孔DNA制备板置于负压装置上；在PCR、酶切、酶标或测序反应液中，加3个体积的BufferPCR-A（若BufferPCR-A

3、不足100ml，加至100ml）；混合均匀后转移到96孔DNA制备板中，开启并调节负压至-25-30英寸汞柱，缓慢吸掉板中溶液。2A．加0.3mlBufferW2，吸尽管中溶液。以同样的方法再用0.3mlBufferW2洗涤两次。*确认在BufferW2concentrate中已按试剂瓶上的指定体积加入无水乙醇。3A．保持负压将96孔DNA制备板抽吸10min。4A．导流管朝下将96孔DNA制备板于长纤维性纸巾上用力拍击6次。5A．将96孔DNA制备板置于96孔V型底板上，在膜正中央加25-30ml

4、水或Eluent，室温静置1min。≥3,000×g离心5min洗脱DNA。B.离心法1B．在PCR、酶切、酶标或测序反应液中，加3个体积的BufferPCR-A（若BufferPCR-A不足100ml，加至100ml）；混匀后，转移到96孔DNA制备板中，将96孔DNA制备板置于96孔1.6ml深孔板中，1,000×g离心1min，弃滤液。2B．在96孔DNA制备板中，加0.3mlBufferW2，1,000×g离心1min，弃滤液。以同样的方法再用0.3mlBufferW2洗涤一次。*确认在Bu

5、fferW2concentrate中已按试剂瓶上的指定体积加入无水乙醇。3B．将96孔DNA制备板置于96孔1.6ml深孔板中，≥3,000×g离心10min。4B．将96孔DNA制备板置于洁净的96孔V型底板中，在膜正中央加25-30ml水或Eluent，室温静置1min。≥3,000×g离心5min洗脱DNA。