绿茶水提物对Hela细胞体外增殖的抑制.doc

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1、科研训练报告绿茶水提物对Hela细胞体外增殖的抑制学院专业班级学号姓名时间地点指导教师目的：通过科研训练，让学生初步了解中草药对肿瘤细胞增殖抑制的研究方向，培养学生检索和阅读中英文文献资料的能力，培养学生独立完成实验的能力，能够对实验中的现象进行讨论和简单的结果分析，为实验论文的书写奠定良好的基础，能够完成科研训练报告的撰写。主要内容：1.   学会使用网络工具查阅资料，以“细胞体外培养，肿瘤细胞，绿茶水提物，”等为关键词进行资料的查询；2.   对查得的资料进行分析；3.完成绿茶水提物与肿瘤细胞的联合培养；4.   对实验中的现象进行讨论和简单的结果分析；5.   撰

2、写科研训练报告。指导教师评语：成绩评定签字年月日注：本页由教师填写绿茶水提物对Hela细胞体外增殖的抑制摘　要：本研究通过细胞体外培养、MTT比色法等方法，研究绿茶水提物(GreenTeaExtract，GTE）对Hela子宫颈癌细胞体外增殖的抑制作用。实验结果表明：随着绿茶水提物浓度的增加，绿茶水提物对细胞的增殖抑制作用越明显，其中浓度为90mg/ml的绿茶水提物对Hela子宫颈癌细胞的增殖抑制作用最明显,绿茶水提物对Hela子宫颈癌细胞的半致死抑制浓度IC50值为102.515。关键词：绿茶水提物肿瘤细胞增殖抑制StudyofGrowthInhibitionEffe

3、ctofGreenTeaExtractonHelaCellsAbstract：Thisstudyusesvitrocellculture,MTTassayingtostudygreenteaextract(GTE)controllingHelacellsistoreproduce.ExperimentalresultsshowthatwithincreasingconcentrationofGTE,GTEonHelacervicalcancercellproliferationmoreobviously,andtheinhibitedtheproliferationis

4、themostobviouslywhentheconcentrationof90mg/mlofGTEoncervicalcancercells,thevalueofGTEforHelacervicalcancercelllineHelainhibitoryconcentration(IC50)is102.515.Keywords:GreenTeaExtract;tumorcells;proliferation;Inhibition前言宫颈癌是全球妇女中仅次于乳腺癌和结直肠癌的第3个常见的恶性肿瘤，在发展中国家是仅次于乳腺癌居第2位常见的恶性肿瘤是最常见的女性生殖道恶性肿

5、瘤。全球每年新发的宫颈癌病例大约在50万左右，其中80%发生在发展中国家。我国每年新发宫颈癌病例13万以上，大约占世界每年新发宫颈癌病例的三分之一，这是很高的数字。宫颈癌发病率就目前来讲，仍然是女性生殖道恶性肿瘤的首位！这是一个非常值得大家关注的疾病，在2004年-2010年《中华癌症预防与控制规划纲要》已经明确地将宫颈癌列为我国十大重点防治的癌症之一。目前，饮食中的化学防癌物成为人们的研究热点，因为有些植物的化学成分能阻止人体内致癌物的形成，比如绿茶中的表没食子儿茶素没食子酸酯(epigallocatechin-3-gallate，EGCG)，是茶多酚中含量最高、活性

6、最强的单体[1]，具有抑制肿瘤细胞生长，诱导肿瘤细胞凋亡的活性[2]。RECK基因在多种正常人体组织中均表达，是新发现的一种基质金属蛋白酶（matrixmetalloproteinases,MMPs）抑制剂，是由Takahashi[3]等在转染v-Ki-ras的细胞株NIH-3T3中分离出来的一种转录抑制基因。而基质金属蛋白酶-2（MMP-2）是引起细胞外基质(ECM)降解的最重要的酶类之一，参与炎症、组织纤维化、新血管形成和肿瘤的侵袭转移等过程[4-7]。最新研究表明，EGCG能显著抑制结肠癌细胞转移和侵袭[8]，MMP-2表达降低也能减弱LOVO结肠癌细胞的侵袭活性

7、[9]。为了进一步证实其中的联系，本研究拟采用不同剂量的EGCG处理人结肠癌HT-29细胞不同时间，观察其增殖和凋亡的变化，同时检测RECK和MMP-2mRNA和蛋白表达水平的改变，来进一步探讨其机制。本研究采用了传统的中药煎煮法制备了绿茶水提物，通过绿茶水提物与HeLa细胞的共同培养，探索绿茶水提物对HeLa细胞的体外增殖抑制作用。一、实验材料1.1样品、试剂、仪器1.1.1提取物的制备(1)秤取4g绿茶，浸泡后将其剪碎；(2)加入200mL超纯水，移置电磁炉，使其大火煮沸，后小火继续煎煮4小时，采用8层纱布进行过滤；(3)将滤渣重复步