壳寡糖对Hela细胞的增殖抑制与诱导凋亡.pdf

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1、２０１５年河北大学学报（自然科学版）２０１５第３５卷第１期ＪｏｕｒｎａｌｏｆＨｅｂｅｉＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ（ＮａｔｕｒａｌＳｃｉｅｎｃｅＥｄｉｔｉｏｎ）Ｖｏｌ．３５Ｎｏ．１ＤＯＩ：１０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．１０００１５６５．２０１５．０１．０１２壳寡糖对Ｈｅｌａ细胞的增殖抑制与诱导凋亡韩绍芳１，周艳芬１，２，倪志华１，２，武金霞１，２，王振山１，２（１．河北大学生命科学学院，河北保定０７１００２；２．河北省生物工程技术研究中心，河北保定０７１００２）摘要：为了明确壳寡糖（ＣＯＳ）对Ｈｅｌａ细胞的增殖抑制作用及对凋亡的

2、影响，采用３（４，５二甲基噻唑２）２，５二苯基四氮唑溴盐（ＭＴＴ）法检测增殖抑制作用，ＷｒｉｇｈｔｓＧｉｅｍｓａ及吖啶橙溴乙锭（ＡＯＥＢ）染色观察凋亡细胞的形态，ＡｎｎｅｘｉｎＶＦＩＴＣ／ＰＩ法检测凋亡率，免疫组化法分析Ｂａｘ，Ｂｃｌ２和Ｓｕｒｖｉｖｉｎ表达量变化．结果显示：不同浓度ＣＯＳ处理Ｈｅｌａ细胞均能抑制增殖，５．０ｍｇ／ｍＬ并作用２４ｈ对其增殖抑制率为５２．１５％（犘＜０．０１）．ＷｒｉｇｈｔｓＧｉｅｍｓａ染色显示细胞形态趋近圆形，贴壁能力减弱，出现凋亡小体．ＡＯＥＢ染色时细胞出现早

3、期和晚期凋亡现象．ＡｎｎｅｘｉｎＶＦＩＴＣ／ＰＩ检测细胞凋亡率为３１．７５％（犘＜０．０５）．免疫组化分析细胞内Ｂａｘ表达量增加，Ｂｃｌ２和Ｓｕｒｖｉｖｉｎ表达量降低．表明ＣＯＳ能够抑制Ｈｅｌａ细胞增殖并诱导凋亡，其原因与Ｂａｘ的上调和Ｂｃｌ２与Ｓｕｒｖｉｖｉｎ的下调相关．关键词：壳寡糖；Ｈｅｌａ细胞；增殖抑制作用；细胞凋亡中图分类号：Ｑ７５３文献标志码：Ａ文章编号：１０００１５６５（２０１５）０１００６２０８犈犳犳犲犮狋狊狅犳犮犺犻狋狅狅犾犻犵狅狊犪犮犮犺犪狉犻犱犲（犆犗犛）狅狀狆狉狅犾犻犳犲狉犪狋犻狅狀犻狀犺犻

4、犫犻狋犻狅狀犪狀犱犪狆狅狆狋狅狊犻狊犻狀犎犲犾犪犮犲犾犾犾犻狀犲ＨＡＮＳｈａｏｆａｎｇ１，ＺＨＯＵＹａｎｆｅｎ１，２，ＮＩＺｈｉｈｕａ１，２，ＷＵＪｉｎｘｉａ１，２，ＷＡＮＧＺｈｅｎｓｈａｎ１，２（１．ＣｏｌｌｅｇｅｏｆＬｉｆｅＳｃｉｅｎｃｅｓ，ＨｅｂｅｉＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｂａｏｄｉｎｇ０７１００２，Ｃｈｉｎａ；２．ＲｅｓｅａｒｃｈＣｅｎｔｅｒｏｆＢｉｏｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇｏｆＨｅｂｅｉＰｒｏｖｉｎｃｅ，Ｂａｏｄｉｎｇ０７１００２，Ｃｈｉｎａ）犃犫狊狋狉犪犮狋：Ｔｏｅｘｐｌｏｒｅｔｈｅｅｆｆｅｃｔｏｆｉｎｈｉｂｉｔ

5、ｉｎｇｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎａｎｄｔｈｅｍｅｃｈａｎｉｓｍｏｆａｐｏｐｔｏｓｉｓｉｎｄｕｃｅｄｂｙｃｈｉｔｏｏｌｉｇｏｓａｃｃｈａｒｉｄｅ（ＣＯＳ）ｏｎＨｅｌａ，３（４，５ｄｉｍｅｔｈｙｌ２ｔｈｉａｚｏｌｙｌ）２，５ｄｉｐｈｅｎｙｌ２Ｈｔｅｔｒａｚｏｌｉｕｍｂｒｏｍｉｄｅ（ＭＴＴ）ａｓｓａｙｗａｓｕｓｅｄｆｏｒｅｖａｌｕａｔｉｏｎｏｆｐｒｏｆｅｒａｔｉｏｎ，ｔｈｅｍｏｒｐｈｏｌｏｇｉｃａｌｃｈａｎｇｅｓｏｆｃｅｌｌｓｕｓｉｎｇＷｒｉｇｈｔｓＧｉｅｍｓａａｎｄＡＯＥＢｓｔａｉｎｉｎｇｗｅｒｅｏｂ

6、ｓｅｒｖｅｄ，ＡｎｎｅｘｉｎＶＦＩＴＣ／ＰＩｄｏｕｂｌｅｓｔａｉｎｉｎｇｗａｓｅｍｐｌｏｙｅｄｆｏｒｑｕａｎｔｉｆｙｉｎｇａｐｏｐｔｏｔｉｃｃｅｌｌｓｂｙｆｌｏｗｃｙｔｏｍｅｔｒｙａｎｄｔｈｅｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｌｅｖｅｌｏｆＢａｘ，Ｂｃｌ２，ＳｕｒｖｉｖｉｎｉｎＨｅｌａｗｅｒｅｄｅｔｅｃｔｅｄｂｙｉｍｍｕｎｏｈｉｓｔｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ．ＴｈｅｒｅｓｕｌｔｓｓｈｏｗｅｄｔｈａｔｄｉｆｆｅｒｅｎｔｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｓｏｆＣＯＳｃｏｕｌｄｉｎｈｉｂｉｔｅｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎｏ

7、ｆＨｅｌａ．Ａｆｔｅｒｔｒｅａｔｅｄｗｉｔｈ５．０ｍｇ／ｍＬＣＯＳｆｏｒ２４ｈ，ｔｈｅｒｅｗａｓａｍａｘｉｍｕｍ（ｕｐｔｏ５２．１５％，犘＜０．０１）．ＷｒｉｇｈｔｓＧｉｅｍｓａｓｔａｉｎｉｎｇｓｈｏｗｅｄｔｈａｔｃｅｌｌｍｏｒｐｈｏｌｏｇｙｂｅｃａｍｅｒｏｕｎｄａｎｄｓｏｍｅｃｅｌｌｓｆｌｏａｔｅｄａｂｏｖｅｔｈｅｗａｌｌａｌｓｏａｐｏｐｔｏｓｉｓｃｅｌｌｓｉｎｅａｒｌｙｐｈａｓｅａｎｄｌａｔｅｐｈａｓｅｗｅｒｅｏｂｓｅｒｖｅｄｂｙＡＯＥＢｓｔａｉｎｉｎｇ．ＡｎｎｅｘｉｎＶＦＩＴＣ／ＰＩｑｕａｎｔｉｔａｔｉｖｅ

8、ｄｅｔｅｃｔｉｏｎｔｈｅａｐｏｐｔｏｓｉｓｒａｔｅｏｆｃｅｌｌｓｗａｓ３１．７５％（犘＜０．０５）．ＴｈｅｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｌｅｖｅｌｏｆｐｒｏａｐｏｐｔｏｔｉｃｐｒｏｔｅｉｎＢａｘｗａｓｉｎｃｒｅａｓｅｄｂｙｉｍｍｕｎｏｈｉｓｔｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，ｈｏｗｅｖｅｒ，ｔｈｅｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ收稿日期：２０１４０