从活化酵母中提取葡聚糖的工艺研究

《从活化酵母中提取葡聚糖的工艺研究》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、从活化酵母中提取β-葡聚糖的工艺研究［摘要］笔者采用酸法、碱法和酸碱融合法提取酵母细胞壁中的β-葡聚糖，对得率和纯度进行对比分析后，发现用碱法浸提工艺从破壁酵母中提取碱不溶性β-葡聚糖效率最高。通过正交试验得出最佳提取条件为：在75°C条件下、0.75mol/L的碱液处理15min。不同脱水和干燥条件的对比实验表明：脱水和干燥条件影响产品的色泽；溶剂和水分蒸发得越快，产品最终含水率越低，产品颜色越白。［关键词］酵母细胞壁β-葡聚糖碱法酸法酸碱法0.引言β-葡聚糖作为活性多糖不仅具有免疫促进作用，而且具有抗癌、抗肿瘤、提高抗病能力和降低胆

2、固醇等生理活性，是一类研究较多的活性多糖。由于其具有高粘性、高持水性和热稳定性，以及制备工艺简单等方面的优点，在食品、医学、化妆品、造纸和建筑材料等行业得以广泛应用。在国内外相关研究报道中，对于β-葡聚糖的制备，有酸法，碱法，以及酸碱、有机溶剂和酶相结合的方法。其中，碱法由于其浸提工艺简单，产品纯度高，是从废弃酵母中有效提取高纯度β-葡聚糖的理想途径。本文在对比酸法、碱法和酸碱法的基础上，主要研究用碱法工艺提取β-葡聚糖的最佳条件，并分析不同提取条件对产物得率和纯度的影响，以及干燥和脱水条件的选择对结果的影响，为啤酒生产中的废酵母泥利用

3、提供技术参考。1.材料与方法1.1材料和试剂酵母粉，乙酸，NaOH,无水乙醇，无水乙醚，硫酸等，均为分析纯。1.2方法1.2.1酵母破壁盐法破壁：在酵母菌体浓度10％，氯化钠浓度2.5％，破壁时间2.5h，破壁温度70℃的实验条件下进行破壁。1.2.2酸法配制1.0mol/L醋酸溶液60mL，加入酵母粉3g，在70℃下水浴1-2小时。3000r/min离心15min,沉淀物水洗2次，然后用无水乙醇洗涤，无水乙醚脱水，在37℃条件下干燥至恒重。1.2.3碱法配制1.0mol/LNaOH溶液60mL，加入酵母粉3g，在70℃下水浴1-2小时

4、。3000r/min离心15min,沉淀物水洗2次，然后用无水乙醇洗涤，无水乙醚脱水，在37℃条件下干燥至恒重。1.2.4酸碱法4g酵母粉加适量水制成酵母泥，加入200mL1mol/LNaOH在90℃下，作用2h后3000r/min离心15min，水洗2遍，加入4%的乙酸溶液50mL室温处理2h，3000r/min离心10min后，用无水乙醇和无水乙醚分别脱水两次，在37℃下干燥12h至恒重。1.2.5碱法分离提取的最佳实验条件表1碱法分离提纯β-葡聚糖正交实验采用碱法分离提纯β-葡聚糖时，其得率和纯度受多种因素影响，通过单因素试验，初

5、步确定碱处理时间、碱处理温度、碱液浓度为主要因素，进而通过正交实验，确定碱法分离提纯β-葡聚糖的最佳工艺条件。碱法分离提纯β-葡聚糖正交实验设计见表1，每个处理用2g酵母粉，60mLNaOH，通过正交试验处理后，3000r/min离心15min，沉淀物水洗两遍，用无水乙醇在75℃条件脱水1-2h，然后在干燥箱中干燥至恒重，记录结果并分析。1.2.6葡聚糖含量测定用苯酚—硫酸法，在490nm处测定标准葡萄糖溶液在不同浓度（mg/mL）下的吸光度OD，以OD为纵坐标，标准葡萄糖浓度(mg/mL)为横坐标绘制工作曲线。对所测样品经准确称量后，

6、用H2SO4完全水解，加苯酚显色，在490nm处测得各样品的OD,然后通过工作曲线计算各样品葡聚糖的含量。1.2.7脱水和干燥条件对产品色泽的影响将所得β-葡聚糖依次用不同量的无水乙醇和无水乙醚脱水，探讨无水乙醇和无水乙醚用量对β-葡聚糖色泽的影响。将所得β-葡聚糖进行自然干燥和真空干燥，比较两种干燥方法对β-葡聚糖色泽的影响。2.结果分析2.1酸法、碱法和酸碱法结果对比分析分别对三种不同工艺所得的产品进行计算得率：葡聚糖得率=葡聚糖（沉淀物）/酵母干重x100%。表2酸法、碱法和酸碱法的对比2.2正交试验的结果表3碱法提取正交试验结果

7、实验号温度/℃时间/min碱液浓度mol/L175150.50275300.75375601.00485150.75585301.00685600.507100151.008100300.509100600.75因素方法实验条件实验用料葡聚糖/g得率/%纯度/%温度/°C时间/min酸法7060-1201mol/L乙酸3g酵母粉0.76925.6341.22碱法75150.5mol/LNaOH2g酵母粉0.48624.3354.33酸碱法变温2401mol/LNaOH4%乙酸4g酵母粉0.9122.7571.22实验号粗葡聚糖/g纯葡聚

8、糖/g得率/%纯度/%10.4860.264024.3354.3320.39760.218119.8854.8530.24220.134812.1155.6540.44380.222922.1950.225