LKB1基因对乳腺癌细胞促进微血管生成的因子基因表达的影响.pdf

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1、现代肿瘤医学2004年8月第12卷第4期·279·LKB1基因对乳腺癌细胞促进微血管生成的因子基因表达的影响12庄志刚,邵志敏【摘要】目的研究LKB1基因对乳腺癌细胞促进微血管生成的因子基因表达的影响及机理。方法筛选LKB1基因转染的MDA-MB-435乳腺癌细胞,随机取样一株高表达细胞株和一株低表达细胞株,同时与未转染细胞株和空质粒转染细胞株比较。用RT-PCR观察促进微血管生成的因子的基因表达和分泌情况,并用Westernblot对其蛋白定量分析。并采用Tramswell试验(Matrigel胶侵袭力检测法)对其进行

2、膜穿透能力检测。结果无论从mRNA还是蛋白水平上分析LKB1转染的乳癌细胞的促进微血管生成的因子基因表达VEGF和bFGF较未转染细胞和空质粒细胞为低,且高表达LKB1的细胞较低表达者为低。相似的结果在Tramswell试验得到证实。结论LKB1基因作为一种抑癌基因在乳腺癌细胞的侵袭和转移中起到重要作用,特别对促进微血管生成的因子作用不容忽视。【关键词】LKB1基因;促进微血管生成的因子;乳腺癌细胞;侵袭和转移【中图分类号】R737.9【文献标识码】A【文章编号】1672-4992(2004)04-0279-061The

3、studyofLKB1geneonvascularendothelialgrowthfactorbybreastcancercellsZHUANGZhi-gang,SHAO2Zhi-min1.DeparmentofBreast,ShanghaiFirstFeto-maternalHospital,Shanghai200040,DeparmentofBreast,CancerHospital,FudanUniversity,Shanghai200032,China【Abstract】ObjectiveToinvestiga

4、tetheeffectofLKB1geneonvascularendothelialgrowthfactorbybreastcancercells,andtheunderlyingmechanisms.MethodsToscreenoutthecorrespondingpositivecloneofMDA-MB-435/LKB1,drawoutinrandomofMDA-MB-435/LKB1(H)andMDA-MB-435/LKB1(L).TocontrastwithMDA-MB-435andMDA-MB-435/ve

5、c.VEGFandbFGFmRNAcontentswereassayedbyRT-PCR.ProteincontentsweredeterminedbyWesternBlotanalysis.ThealterationofcellularmigrationpropertywasevaluatedbycellmigrationthroughaMatrigelmodelbasementmembrane.ResultsInMDA-MB-435/LKB1,theexpressionofVEGFandbFGFwasde-tecte

6、dbyRT-PCR,Westernblotwerereduced,too.Moreover,thesameresultincellmigrationabilitythroughaMa-trigelmodelbasementmembrane.ConclusionOurresultsshowtheinvasionandmetastasisassociatedgeneswerealteredinMDA-MB-435withLKB1.Especiallytheeffectofthevascularendothelialgrowt

7、hfactor.【Keywords】LKB1gene;vascularendothelialgrowthfactor;breastcancercell;invasionandmetastasis(ModernOncology2004,12(4):279~284)许多研究成果提示:LKB1作为一种肿瘤抑制基瘤研究奠定了坚实的基础。在肿瘤侵袭前期,肿瘤[1,2]因可能是通过改变细胞的凋亡而起作用。LKB1细胞的生长主要依靠扩散取得营养;当肿瘤直径超在体内是通过与其它蛋白相互作用如磷酸化或甲基过一定程度时,必须依靠所诱发的血管

8、生成来维持[3,4]化而控制细胞。2001年Antti等人在小鼠的胚其继续生长,已阐明有多种血管生成多肽和激活物,胎中发现LKB1基因缺如者,其血管的生成和发育对肿瘤的生长和激活起了一定作用[7]。血管生成的异常,且与VEGF的表达相关联。他们推测LKB1可过程包括微血管内皮细胞的游走和增殖,蛋白水解能与VEGF的信

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