细胞自噬与卵巢癌SKOV3细胞及其耐药株SKOV3／DDP对顺铂敏感性的关系.pdf

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1、862WWW．tumorsci．org肿瘤2013年1O月第33卷第10期TUMORVo1．33，October2013DOI：10．3781~．issn．1000—7431．2013．10．003Copyright~2013byTUMOR基础研究·BasicResearch细胞自噬与卵巢癌SKOV3细胞及其耐药株SKOV3／DDP对顺铂敏感性的关系吴小华，陈亚楠，杨波，周楠，王娜，许鹏宇中国人民解放军白求恩国际和平医院妇产科，河北石家庄050082[摘要】目的：探讨细胞自噬与卵巢癌SKOV3细胞及其顺铂(cisplatin，DD

2、P)耐药株SKoV3／DDP对DDP敏感性的关系。方法：在透射电子显微镜下观察SKOV3和SKOV3／DDP细胞的白噬体形成情况；MTT法筛选自噬抑制剂3一甲基腺嘌呤(3一methyladenine，3-MA)对SKOV3和SKOV3／DDP细胞的无毒剂量，并检测3-MA联合DDP干预后SKOV3和SKOV3／DDP细胞对DDP敏感性的变化；分别采用FCM法和蛋白质印迹法检测单用DDP和3一MA及DDP联合3一MA作用后，SKOV3和SKOV3／DDP细胞的凋亡率和自噬标志蛋白微管结合蛋白1轻链3(microtubule—asso

3、ciatedprotein1lightchain3，MAP1LC3，LC3)和自噬相关蛋白Beclinl的表达。结果：透射电子显微镜下观察可见SKOV3／DDP细胞内有多个自噬体形成，SKOV3细胞内仅可见少量自噬体形成。与DDP单独作用相比，DDP联合3一MA作用时DDP对SKOV3／DDP细胞的半数抑制浓度(halfinhibitoryconcentration，IC)值由(17．71±0．15)gg／mL下降到(8．85±0．11)gg／mL(P

4、％(P<0．05)，LC3和Beclinl蛋白的表达水平明显下调(P<0．05)，而SKOV3细胞无明显变化。结论：卵巢癌DDP耐药性的形成可能与自噬水平增高有关，抑制细胞自噬可以增强SKOV3／DDP细胞对DDP的敏感性。【关键词】卵巢肿瘤；自噬；顺铂；耐药；3-MA【中图分类号]R737．31【文献标志码】A[文章编号】1000—7431(2013)10—0862—06TherelationshipbetweenautophagyandthesensitivitytocisplatininovariancancerSKOV3a

5、ndSKoV／DDPcellsWUXiao—hua。CHENYa—nan，YANGBo，ZHOUNan，WANGNa，XUPeng—yuDepartmentofObstetricsandGynecology，BethuneInternationalPeaceHospitaloftheChinesePeople’sLiberationArmy，Shijiazhuang050082，HebeiProvince，China【ABSTRACT]Objective：ToinvestigatetherelationshiPbetweenthe

6、autophagyandthesensitivitytoDDP(cisplatin)inePitheIjalovariancancerSK0V3andSKOV3／DDPcelIs．Methods：TheformationofautoPhagosomesinSKOV3andSK0V3／DDPcellswasobservedunderaTEM(transmissionelectronmicroscope)．MTTassaywasusedtoscreenthedoseofnontoxicreactionofautophagyinhibi

7、tor3一MA(3一methyladenine)andtoexaminethesensitivitytoDDPinSKOV3andSK0V3／DDPcellsaftertreatmentwiththecornbinationofDDPand3一MA．TheapoptoticrateandtheexpressionsofautophagicmarkerproteinLC3(microtubule—associatedprotein1Ilghtchain3)andautophagy—relatedproteinBecIin1inSKO

8、V3andSKOV3／DDPcellsaftertreatmentwithDDPand3一MAaloneandthecombinationofDDPand3一MAweredetectedbyflowcytometryandWesternbIotti