黄连温胆汤对2型糖尿病小鼠学习记忆及海马神经细胞形态的影响.pdf

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1、时珍国医国药2012年第23卷第4期LISHIZHENMEDICINEANDMATERIAMEDICARESEARCH2012VOL．23NO．4黄连温胆汤对2型糖尿病小鼠学习记忆及海马神经细胞形态的影响张卫华，刘舟，石富国，陈志明(1．南京中医药大学，江苏南京210046；2．中国药科大学2009级硕士研究生，江苏南京211198)摘要：目的研究黄连温胆汤对2型糖尿病小鼠学习记忆及海马神经细胞形态的影响。方法小鼠喂养高糖、高脂、高热量饲料4周后，腹腔注射链脲佐菌素(STZ)100mg／kg，制备糖尿病小鼠模型，随机分为二甲双胍阳性对照组，模型对照组，黄连温胆汤低、中、高剂量组。黄连温胆汤低

2、中高剂量组，分别给黄连温胆汤5，10，20(按生药量计)。阳性药组给予二甲双胍250mg／kg。连续给药3周后进行跳台实验和水迷宫实验，海马组织HE染色光镜观察。结果黄连温胆汤中、高组、二甲双胍组与模型组比较，小鼠潜伏期明显减低，而错误次数明显减少。黄连温胆汤中、高剂量组海马神经细胞损伤程度较低剂量组轻。结论黄连温胆汤对糖尿病小鼠学习记忆有明确改善作用，且可以减轻海马神经元细胞损伤。关键词：黄连温胆汤；糖尿病；学习记忆；病理DOI标识：doi：10．3969／i．iSSn．1008-0805．2012．04．073中图分类号：R285．5文献标识码：B文章编号：1008-0805(2012)

3、04-0948-02黄连温胆汤是临床有效方剂，由黄连、竹茹、半夏、枳实、陈料，共喂养4周。4周后，高脂高糖饲料喂养组禁食不禁水14h，皮、茯苓、甘草、生姜组成，具有清热化痰、理气和中的功效。有临腹腔注射STZ100mg／kg整个操作在冰浴上进行，且保证整个注床报道0’，黄连温胆汤治疗糖尿病、血管性痴呆取得了较好的射过程在15rain内完成。注射72h后，禁食不禁水12h，采用葡效果。本文采用动物模型，研究黄连温胆汤的对2型糖尿病小鼠萄糖氧化酶法测量小鼠空腹血糖，空腹血糖值>11mmol／L者为学习记忆及海马神经细胞形态的影响。现报道如下。糖尿病小鼠，去除血糖值不达标小鼠，按照血糖值随机分为二

4、甲1材料与仪器双胍阳性对照组，模型对照组，黄连温胆汤低剂量组、中剂量组和1．1药物与试剂二甲双胍，规格0．25g，090529B，生产厂家：上高剂量组。海医药(集团)有限公司信宜制药厂。黄连温胆汤组成药物均购2．1．2给药黄连温胆汤共3个剂量组，给药剂量分别低剂量5于南京先声药店丁家桥店，并经中国药科大学中药资源开发教研，中剂量10，高剂量20kg(按生药量计)。阳性药组：室秦民坚教授鉴定。药物浸泡30rain后，加8倍量的双蒸水，从二甲双胍，给药剂量为250mg／kg。灌胃给药组均连续灌胃给药煮沸起计时1h。倒出药液后，重复加4倍水煎煮0．5h两次。3周，给药期间仍然以高营养饲料喂养。药液

5、用8层纱布过滤2次，60℃水浴旋蒸至浓度为2g／ml(按生2．2观测指标及检测方法药量计算)，4℃保存。链脲佐菌素(STZ)，购于美国sigma公司，2．2．1学习记忆实验动物给药3周后，进行学习记忆实验。批号S一0130；临用前以预冷的柠檬酸缓冲液将STZ粉末溶解，跳台：将小鼠放入反应箱内适应环境3rain，然后立即通以配成1％的STZ溶液。葡萄糖测定试剂盒，购于南京建成有限公36V交流电，训练5min并记录错误次数，以此作为学习成绩。司，批号：20100701，上海荣盛生物药业有限公司生产。饲料为高24h后重作测试，记录第一次跳下平台的潜伏期和5rain内错误糖、高脂、高热量饲料的配方(

6、蔗糖：猪油：奶粉：鸡蛋：猪胆酸盐：次数。普通饲料粉=30：20：4：2：0．05：63)，由江苏省南京市青龙通道式水迷宫实验：水迷宫装置为80cm×50cmx20cm的山动物养殖场提供。茶色有机玻璃槽，内设起点、终点(台阶)和4处盲端，水深101．2动物动物：清洁级ICR小鼠，4周龄，体质量18～22g，江cm，水温(25±2)℃。固定终点，每天依次改变起点位置，训练4苏省南京市青龙山动物养殖场提供，许可证号：SCXK(苏)2007．d，2次／d。记录小鼠在水迷宫内从起点到达终点的游出时间(潜0001。动物分笼饲养，保持12h昼夜节律，室温(22±1)cC，自由伏期)和进入盲端的次数(错误次

7、数)。第4天训练完成2h后再饮水摄食。训练一次，作为学习成绩，第5天开始进行测试成绩作为记忆成1．3仪器OLYMPUSBX50型光学显微镜(日本OLYMPUS公绩。以潜伏期和错误次数来衡量小鼠的学习记忆能力。潜伏期司)；SMG一2通道式水迷宫(中国医学科学院药物研究所)；STI"越短，错误次数越少，说明小鼠的学习记忆能力越强。一2跳台仪(中国医学科学院药物研究所)。2．2．2海马神经细胞形态学习记忆实验结束后