发酵床养猪模式中猪肠道与垫料间的菌群相关性分析-论文.pdf

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1、第35卷第2期家畜生态学报Vo1．35NO．22014年2月ActaEcologiaeAnimalisDomasticiFeb．2014⋯。‘生态养殖2⋯㈨．o．发酵床养猪模式中猪肠道与垫料间的茵群相关性分析周学利，吴锐锐。，李小金，方国跃(1．安徽省农业科学院畜牧兽医研究所，安徽合肥23003l；2．安徽省种畜禽质量测定站，安徽滁州239083)[摘要]为研究发酵床养殖模式的菌群分布，采集发酵床猪场不同饲养阶段的猪肠道内容物和发酵床垫料进行细菌分离，检测菌株的致病性与耐药性。结果表明，从各阶段猪的肠道内容物和垫料中均可分离到大肠杆菌、沙门氏菌、链球菌、葡萄球菌和普通枯草芽孢杆菌，在各垫料

2、样品中分离到了黏液性枯草芽孢杆菌，但同种细菌在不同样品中的含量不同；分离到的大肠杆菌、沙门氏菌、链球菌和葡萄球菌中均存在耐药性严重的致病菌株。研究结果显示，发酵床的垫料和猪肠道内容物中含有的细菌种类基本相同，但含量差异较大，表明细菌与环境之间具有双向的选择性和适应性。[关键词]发酵床养猪；猪肠道内容物；垫料；菌群[中图分类号]$811．6[文献标识码]A[文章编号]1005—5228(2014)02—0070—05发酵床养猪模拟原始的动物、植物和微生物共中均广泛存在致病菌与非致病菌口，而且同种细菌生的生态系统，在猪舍内铺设一定厚度的谷壳、锯末在不同种动物的环境中含量存在差异，表明不同和秸秆

3、等富含纤维的植物，混以“发酵床专用益生动物与其环境中的细菌之间存在抑制性和适应性。菌”，猪排出的粪尿在垫料中经微生物发酵降解、消为了进一步了解发酵床垫料与猪肠道中各种细化，从而达到猪舍免冲洗、粪尿无排出、限药无公害菌的分布，以及垫料与猪肠道之间的细菌是否存在的节约、保暖、环保和健康等目的L1]。我国自起源相关性，我们采集了某发酵床养殖场不同日龄猪只国引入该项技术[5]，相继在江苏、福建、山东等地研的肠道内容物以及不同饲养阶段的发酵床垫料，分究推广并取得了较好的成果_7]。析了所采样品中的细菌种类和数量，检测了分离菌发酵床养猪符合猪的生活习性，是目前饲养管株的致病性和致病菌株的耐药性，以期为

4、发酵床养理难度最高、养殖技术最先进、圈舍造价最低廉，以殖模式的疫病防控提供依据。及健康、环保理念最科学的一种生态养猪模式。一1材料与方法些猪场由于在认知、垫料配制、管理技术、设施和责任心等方面的不足，往往难以真正掌握发酵床养猪1．1试验材料技术，出现许多“死床”或者“准死床”，霉菌、寄生虫试验用20g昆明小鼠，购自安徽医科大学动物及致病菌容易在垫料中增殖l8。。实验中心。胰蛋白胨大豆琼脂平板(TSA)、胰蛋白因此，在不考虑环保成本的前提下，发酵床养猪胨大豆培养基(TSB)、血平板、麦康凯平板、生理盐模式在国内越来越受到试用者多方面的质疑。持反水、PBS缓冲液(pH7．2)，参照文献[15]

5、由实验室对观点的人尤其担心垫料中的有害微生物会打破猪自制。微量生化反应管、革兰氏染液，购自杭州微生肠道内的微生态平衡体系，从而引发疾病。针对环物试剂有限公司。境中细菌的致病性这一焦点问题，郑雪芳等发现发1．2样品采集与保存酵床垫料对各种大肠杆菌的生防效果随发酵床使用无菌采集某发酵床养猪场健康乳猪、保育猪和时间的延长而增加口；伍清林等的研究结果显示，肥育猪新鲜的肠道内容物各15份，以及相应产房、动物园各种健康动物的生活环境(空气、土壤和水)保育舍、肥育舍的发酵床床面下30cm处垫料各15[收稿日期]20130929，修回日期：20131119[基金项目]安徽省农科院现代农业生猪项目资助；安徽

6、省生猪产业技术体系项目资助[作者简介]周学利(1969)，男，安徽人，硕士，副研究员，主要从事动物传染病学和健康养殖研究。E—mail：zxli69@163．corn第2期周学利，等：发酵床养猪模式中猪肠道与垫料间的菌群相关性分析71份，置4℃冰箱保存。于5mLTSB培养基，37℃摇床培养8～12h，分别1．3垫料与肠容物的细菌分离取10L培养液接种于15mLTSB培养基继续培将每份样品取0．5g分别置于灭菌离心管内，养8～12h后，取1OmL培养液于灭菌试管内4000向离心管内各加入1mL生理盐水，混合均匀，用接r／min离心5min，用灭菌PBS液重悬。倍比稀释种环蘸取每个样品浸出液划

7、线接种于2个TSA平菌悬液，采用平板涂布法进行活菌计数；用PBS液板，分别置37℃厌氧、需氧培养18~36h，对不同形将菌悬液稀释成1×10。CFU／mL，取0．5mL稀释态的菌落进行染色、镜检，用TSA平板纯化细菌，以液腹腔注射小鼠，每种菌株注射1只，5只对照组小血平板或麦康凯平板等进行鉴别培养。鼠每只腹腔注射无菌PBS液0．5mL。记录小鼠的1．4分离菌生化鉴定发病情况，及时从死亡小鼠的肝脏分离鉴定病原菌。根据《伯杰