孕妇血清妊娠相关蛋白A鲁米诺氧通道免疫测定方法的建立-论文.pdf

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1、题新笠孕妇血清妊娠相关蛋白A鲁米诺氧通道免疫测定方法的建立第7期·917·doi:10.3969/j.issn.1000-484X.2014.07.012孕妇血清妊娠相关蛋白A鲁米诺氧通道免疫测定方法的建立郝颖新②侯丽英周宇捷张月香②李会强(天津医科大学医学检验学院临床免疫学教研室,天津300203)中图分类号R392-33文献标志码A文章编号1000-484X(2014)07-0917-04[摘要]目的:建立孕妇外周血妊娠相关蛋白A的鲁米诺氧通道免疫测定方法。方法:采用1株鼠抗人PAPP.A单克隆抗体用于生

2、物素标记,兔抗人PAPP—A多克隆抗体包被受体微球,与包被有链霉亲和素的供体微粒共同构成检测试剂,优化检测条件并评价检测性能。结果:本方法的批内及批问精密度为5.91%一7.94%和6.14%一9.69%;分析灵敏度2.8mU/L,功能灵敏度4.6mU/L,在2.8~8000mU/L范围内线性良好;回收率为96.7%~100.3%,通过干扰性实验分析溶血、黄疸和脂血的干扰率均<10%;当PAPP—A浓度高达8000mU/L时,无Hook效应;本文所建立方法检测5O份临床标本,结果与时间分辨荧光分析法的结果相关

3、系数为0.989。结论:本研究建立的方法能够用于孕妇血清PAPP—A的定量测定,检测性能符合临床诊断试剂的要求。[关键词]妊娠相关蛋白A;鲁米诺氧通道免疫测定;均相发光免疫分析;定量分析DevelopmentofluminescentoxygenchannelingimmunoassayforpregnancyassociatedplasmaproteinAHAOy一Xin,HOULi-y,ZHOUYu—Jie,ZHANGYue—Xiang,LIHui—Qiang.DepartmentofClinicalIm

4、munology,CollegeofMedicalLaboratory,TianjinMedicalUniversity,Tianjin300203,China[Abstract]objective:TodevelopaluminescentoxygenchannelingimmunoassayforpregnancyassociatedplasmaproteinA.Methods:ThemonoclonalantibodyofPAPP—Awaslabeledwithbiotin,thepolyclonala

5、ntibodyofPAPP—Awascoatedonreceptorparticles.TheLOCIreagentsalsocontainedsensitizerparticlescoatedwithstreptavidin.Theoptimaltestconditionsandanalyticalper-formanceofthemethodwerestudied.Results:Thewithin—illnandthebetween—runcoefficientsofvariationwere5.91%

6、一7.94%and6.14%一9.69%,respectively;theanalyticalsensitivitywas2.8mU/Landthefunctionsensitivitywas4.6mU/L,goodlinearin2.8mU/L一8000mU/Lrange;therecoveryratewas96.7%一100.3%.Theinterferencerateofhemolysis,icterusandtriglyeerideswerelessthan10%;thereisnoHookeffec

7、tofPAPP-Aconcentrationsupto8000mU/L;thecorrelationcoeficientbetweenclinicalsamplesdetectionresultsandTimeresolvedfluoroimmunoassayanalysisresultswas0.974.Conclusion:ThisLOCIcanbeusedforthequantitativeofserumPAPP—A.anddetectionperformanceinlinewiththerequire

8、mentsofclinicaldiagnosticreagents.[Keywords]PregnancyassociatedplasmaproteinA;Luminescentoxygenchannelingimmunoassay;HomogeneousY;Quantitativeanalysis妊娠相关蛋白A(Pregnancyassociatedplasma加,其水平会持续上升,孕足月时达到高

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