孕妇血清papp-a活性氧传递均相发光免疫测定法的初步建立和临床评价

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1、分类号：R446.6学校代码：10062密级：学号：2011702300硕士学位论文MASTER’SDISSERTATION论文题目：孕妇血清PAPP-A活性氧传递均相发光免疫测定法的初步建立和临床评价TITLEDevelopmentofluminescentoxygenchannelingimmunoassayforPAPP-A（国家高技术研究发展计划-863计划分支项目2012AA022602）一级学科：临床医学二级学科：临床检验诊断学论文作者：郝颖新指导教师：李会强天津医科大学研究生院二〇一五年五月分类号：R446.6学校代码：10062密级：学号：2011702300学

2、位类别：科学学位专业学位学科门类：医学硕士学位论文MASTER’SDISSERTATION论文题目：孕妇血清PAPP-A活性氧传递均相发光免疫测定法的初步建立和临床评价TITLEDevelopmentofluminescentoxygenchannelingimmunoassayforPAPP-A（国家高技术研究发展计划-863计划分支项目2012AA022602）一级学科：临床医学二级学科：临床检验诊断学论文作者：郝颖新指导教师：李会强导师组成员：张月香天津医科大学研究生院二〇一五年五月学位论文原创性声明本人郑重声明：所呈交的论文是我个人在导师指导下独立进行研究工作取得的

3、研究成果。除了文中特别加以标注引用的内容和致谢的地方外，论文中不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的研究成果，与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示了谢意。学位论文作者签名：日期：年月日学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解天津医科大学有关保留、使用学位论文的规定，即：学校有权将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，并采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编以供查阅和借阅。同意学校向国家有关部门或机构送交论文，并编入有关数据库。保密，在年解密后适用本授权书。本论文属于不保密。（请在相对应的方框内打“√”）学位论文作者签名：日

4、期：年月日导师签名：日期：年月日天津医科大学硕士学位论文中文摘要目的：本研究以活性氧传递均相发光免疫分析（LOCI）技术的AlphaScreen平台为基础，研发孕妇血清妊娠相关蛋白A（PAPP-A）的均相免疫检测体系，然后对此体系做方法学和临床评价。方法：本研究的检测体系包括受体微球（PAPP-A多克隆抗体标记）、生物素（PAPP-A单克隆抗体标记）、待测PAPP-A和供体微球，受体微球和生物素化抗体的最适浓度用棋盘滴定的方法加以确定，并进行试剂加样量、反应时间等实验条件的优化。在此基础上，得出拟合方程的标准曲线，用光激化学发光分析仪检测待测临床标本，所得光信号值带入拟合方程计

5、算出PAPP-A浓度，然后对此检测体系进行方法学和临床评价。采用ELISACalc软件进行剂量-反应曲线数学模型及相关统计学分析。结果：本研究建立了孕妇血清PAPP-A活性氧传递均相发光免疫检测体系，并对其进行了实验条件的优化，并对该检测体系进行了方法学和临床评价，灵敏度达到了2.84mU/L；批内和批间精密度分别达到5.91%-7.94%和6.14%-9.69%；回收率在96.7%-100.3%，也符合临床检测的需求；特异性检测中，对血红蛋白的干扰率为8.37%（低值）和6.98%（高值），对总胆红素的干扰率为6.57%（低值）和9.23%（高值），对甘油三酯的干扰率为7.9

6、7%（低值）和9.38%（高值），说明该检测体系有着较强抗溶血、脂血和黄疸的能力；我们还对该检测体系是否发生Hook效应进行了考察，在PAPP-A含量达到8000mU/L时，未见Hook效应发生，线性范围为2.8mU/L-8000mU/L；在与时间分辨荧光分析法的相关性分析中，相关性达到了98.9%。结论：本检测体系检测性能良好，灵敏度、准确性、重复性、抗干扰能力等均较好，可用于定量检测孕妇血清PAPP-A，而且与时间分辨荧光分析法比较，步骤简洁、时间大大缩短、成本较低，进一步研发有望推广临床应用。关键词：妊娠相关蛋白A均相免疫分析活性氧传递均相发光供体微球受体微球I天津医科大

7、学硕士学位论文AbstractObjective:Basedonluminescentoxygenchannelimmunoassay(LOCI)ofAlphaScreenplatform，wedevelopeahomogeneousluminescenceimmunoassaysystemforpregnancyassociatedplasmaproteinA(PAPP-A)detectionandmakeaevaluationofmethodologyandclinical.Method