血清糖链抗原125均相化学发光免疫检测体系的建立

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1、分类号：R446．6密级：学位类别：科学学位团专业学位口0学校代码：1062学一号：2010702034学科门类：医学又肄篑斜矢母硕士学位论文MASTER’SDISSERTATIoN论文题目：血清糖链抗原125均相化学发光免疫检测体系的建立TITLEEstablishmentofhomogeneouschemiluminescentimmunoassayforserumcarbohydrateantigen125(天津市滨海新区自主创新重大项目)一级学科：临床医学二级学科：临床检验诊断学论文作者：赵爽指导教师：李会强天

2、津医科大学研究生院二。一三年五月学位论文原创性声明本人郑重声明：所呈交的论文是我个人在导师指导下独立进行研究工作取得的研究成果。除了文中特别加以标注引用的内容和致谢的地方外，论文中不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的研究成果，与我～同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示了谢意。学位论文作者签名日期：≯瞬西撕学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解天津医科大学有关保留、使用学位论文的规定，即：学校有权将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，并采用影印、缩印或扫描等复制手段保

3、存、汇编以供查阅和借阅。同意学校向国家有关部门或机构送交论文，并编入有关数据库。本论文属于(请在相对应的方框内打“4”)年解密后适用本授权书。学位敝储虢蠡良导师签名：日期：劢务霸如日日期：y『弓年厂月弓嗣在Di密保不天津医科大学硕士学位论文中文摘要作为女性最常见的恶性肿瘤之一，卵巢癌在新型化疗及靶向治疗药物层出不穷的今天其死亡率仍居高不下；主要原因是卵巢癌患者不能得到早期诊断，这使得早期发现并及时诊断变得至关重要。作为全球多机构建议作为危险因素筛查、(有遗传综合征个体)早期诊断及鉴别诊断、疗效和复发监测、预后判断的肿瘤

4、标志物之一的糖链抗原125(CA一125)就变得非常重要。CA一125是Bast等人用人卵巢浆液腺瘤细胞系OVCA433免疫小鼠后获得的OCl25鼠抗人单克隆抗体检测到抗原分子。首个CAl25免疫测定方法是利用OCl25抗体同时用于捕获和检测并于1983年被商品化，目前CAl25测定常用的方法有酶联免疫法、化学发光免疫分析法及电化学发光免疫分析法等。基于鲁米诺氧途径免疫分析技术(LOCI)的均相化学发光免疫分析技术与传统的非均相免疫分析技术相比，具有灵敏度高、时问分辨能力强、线性范围宽、背景荧光低、免洗板、性质稳定、快

5、速简便、易于微量化自动化等优点。目的：采用基于鲁米诺氧途径免疫分析(LOCI)技术的AlphaScreen平台均相发光免疫分析技术研发血清糖链抗原125(CAl25)均相免疫检测体系并对其进行方法学和临床评价。方法：兔抗人CAl25多克隆抗体及鼠抗人CAl25单克隆抗体分别标记受体微球、生物素，组成两对抗体组合，利用棋盘滴定确定较佳抗体组合；利用棋盘滴定法确定抗体标记受体微球及生物素化抗体的最适浓度，并对检测缓冲体系、试剂加样顺序、试剂加样比例及不同阶段反应时间进行优化。在优化基础上建立四参数拟合方程的校准品剂量一反应

6、曲线，根据曲线即可由未知浓度临床标本的发光信号值得出其CAl25浓度。根据上述曲线对临床标本进行检测并做方法学及临床评价。研究中采用ELISACalc软件进行相关统计分析。天津医科大学硕士学位论文结果：本检测试剂用兔抗人CAl25多克隆抗体包被受体微球，生物素标记鼠抗人CAl25单克隆抗体及链霉亲和素包被供体微球共同组成血清CAl25检测体系，以附录中说明书作为操作指南，批内精密度为3．93％一4．40％，批问精密度为5．60％一8．39％；功能灵敏度为3．91U／ml，分析灵敏度为3．49U／ml；回收率为105．1

7、4％一108．74％，；特异性分析中溶血、黄疸和类风湿疾病的干扰率均<10％；本研究所建立检测体系检测80例健康人CAl25浓度上限为26．53U／ml；采用本方法检测50份临床标本结果与RocheElecsys2010电化学发光法所得结果具有良好的相关性，r2=O．974；Z=0．623；使用#检验及一致性分析推断本试剂与进口电化学发光检测试剂无统计学差异。结论：本检测试剂可用于定量检测人血清CAl25，且具有免洗涤，灵敏度高，准确性及重复性好，便于操作等优点，进一步研发有望推广l临床应用。关键词：糖链抗原125鲁米

8、诺氧途径免疫分析均相免疫分析供体微球受体微球AbstractAsoneofthemostcomlllonmalignantcancerinwomen，ovariancancerinnewtypesofchemotherapyandtargetedthempydrugsemceeinendlesslytodayitstotalmor