大黄牡丹汤含药血清对 LPS 刺激的小鼠肺巨噬细胞 TLR4和 MyD88表达的影响-论文.pdf

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1、山东医药2014年第54卷第10期大黄牡丹汤含药血清对LPS刺激的小鼠肺巨噬细胞TLR4和MyD88表达的影响孙燕妮,承解静。杨晓燕,杨洁。王丽敏。刘军(上海中医药大学附属普陀医院,上海200062)摘要:目的探讨大黄牡丹汤含药血清(以下简称含药血清)对脓毒症的治疗机制。方法体外培养小鼠肺巨噬细胞株RAW264.7并随机分为空白组,模型组,含药血清高、中、低浓度组,每组3个复孔。除空白组外,其余四组均予细菌脂多糖(LPS)5g/mL刺激24h,含药血清高、中、低浓度组分别同时给予高、中、低浓度的含药血

2、清进行干预。干预后于37℃、5%CO:培养箱中培养24h。分别采用半定量RT—PCR和Westernblot法测定Toll样受体4(TLR4)及髓样分化因子88(MyD88)mRNA和蛋白表达。结果模型组TLR4和MyD88mRNA和蛋白表达均显著高于空白组(P

3、分化因子88doi:10.3969/j.issn.1002—266X.2014.10.004中图分类号:R563.9文献标志码:A文章编号:1002-266X(2014)10-0010-04EfectofDahuangMudandecoction-containedserumontheexpressionofTLR4andMyD88inlipopolysaccharide-stimulatedpulmonarymacrophagesofratsSUNYan-ni,CHENGJie4ing,YANGXi

4、ao-yan,YANGJie,Li—min,LIUJun(PutuoHospitalAffiliatedtoShanghaiUniversityofTCM,Shanghai200062,China)Abstract:0bjectiveToinvestigatethetherapeuticmechanismofDahuangMudandecoction—containedserum(here-inafterreferredtoasthedrugcontainedserum)inthetreatmento

5、fsepsis.MethodsMousepulmonarymacrophagecelllineRAW264.7wasculturedinvitro,andthenthecellswererandomlydividedintotheblankgroup,modelgroup,high-,moderate-andlow-concentrationdrug·containedselumgroups,eachgroupof3holes.Excepttheblankgroup,otherfourgroupswe

6、restimulatedwithbacteriallipopolysaccharide(LPS)5g/mL,thenweretreatedwithdifferentconcentrationsofdrug-containedserumfor24h.Aftertheintervention,thecellswereculturedin5%CO2at37oCfor24h.ThenthemR—NAexpressionofToll-likereceptor4(TLR4)andmyeloiddifferenti

7、ationfactor88(MyD88)wasmeasuredbysemi-quanti—tativereversetranscription—polymerasechainreaction(RT-PCR),andtheirproteinexpressionwasanalyzedbyWesternblotting.RemitsTheproteinandmRNAexpressionofTLR4andMyD88inthemodelgroupwassignificantlyhigherthanthatoft

8、heblankgroup(P<0.01),buttheproteinandmRNAexpressionofTLR4andMyD88inthehigh—andmoderate—concentrationdrug—containedserumgroupswassignificantlylowerthanthatofthemodelgroup(P<0.o1),andnosignifi—cantdifferenceswasfoundbetweenthehigh—

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