大黄牡丹汤含药血清对脂多糖刺激的小鼠巨噬细胞RAW264．7中TRIF和TRAM表达的影响-论文.pdf

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1、122ChineseJournalofClinicalMedicine，2014．Vo1．21，No．2中国临床医学2014年4月第21卷第2期●论著大黄牡丹汤含药血清对脂多糖刺激的小鼠巨噬细胞RAW264．7中TRIF和TRAM表达的影响刘军承解静杨晓燕杨洁王丽敏孙燕妮(上海中医药大学附属普陀医院急诊内科，上海200062)摘要目的：研究大黄牡丹汤含药血清对细菌脂多糖(1ipopo1ysaccharide，LPS)刺激的小鼠巨噬细胞株RAW264．7中Toll白介素受体相关调节因子(Toll—interleukin1receptor—domain—

2、containingadapterinducinginterferon-b，TRIF)及TR1F相关的接头分子(TRIF-relatedadaptormolecule，TRAM)表达的影响。方法：2O只SD大鼠随机分为4组：对照组以及中药高、中、低浓度组，每组5只。各组大鼠分别相应地以0．9％氯化钠液或高、中、低浓度大黄牡丹汤(13．2、6，6、3．3g／kg)连续灌胃7d，末次灌胃给药2h后行心脏采血并处死，分离血清(即含药血清)。体外培养RAW264．7细胞，随机分为对照组、模型组(LPS处理组)以及中药高、中、低浓度组。除对照组外，其他组均用5

3、／~g／mLLPS刺激RAW264．7细胞24h，3个中药组同时给予相应浓度大黄牡丹汤含药血清进行干预，分别采用RT—PCR和Westernblotting法检测各组细胞中TRIF和TRAM的mRNA和蛋白的表达水平。结果：模型组细胞TRIF和TRAM的mRNA和蛋白表达水平均显著高于对照组(P<0．01)，中药中、高浓度组细胞TRIF和TRAM的mRNA表达水平均显著低于中药低浓度组及模型组(P<0．01)，中药中、高浓度组TRIF和TRAM的蛋白表达水平也明显低于低浓度组(P

4、S刺激后RAW264．7细胞中TRIF和TRAM的表达。关键词大黄牡丹汤；含药血清；巨噬细胞；Toll白介素受体相关调节因子；TRIF相关的接头分子中图分类号R563．9文献标识码AEffectsofDahuangmudanTangDrugSerumonExpressionofTRIFandTRAMinLipopolysaccharide-Stimula—tedRAW264．7MurineMacrophagesLUJunCHENGJejingYANGXiaoyanYANGJieW_ANGLiminSUNYanniDepartmentofEmergen

5、cyMedicine，PutuoHospital，ShanghaiUniversi—tyofTraditionalChineseMedicine，Shanghai200062，ChinaAbstractObjective：ToinvestigatetheeffectofDahuangmudanTangdrugserumontheexpressionofToll—interleukin1re—ceptor—domain-containingadapter—inducinginterferon-h(TRIF)andTRIF—relatedadaptorm

6、olecule(TRAM)inlipopolysaccha—ride-stimulatedRAW264．7murinemacrophagecellline．Methods：TwentySDratswererandomlydividedintocontrolgroup，DahuangmudanTanglowconcentrationgroup，DahuangmudanTangmoderateconcentrationgroup，DahuangmudanTanghighconcentrationgroup。withfiveratsineachgroup．

7、Allratsunderwentgastricperfusiondailywith0．9sodiumchloridesolu—tion，DahuangmudanTanginlow，moderateorhighconcentrations(13．2，6．6and3．3g／kg)，respectively．Bloodwasdrawnfromrats’hearts2hafterendingperfusiononthe7thday，andtheserum(thatisthedrugserum)wasisolatedfortesting。RAW264．7cel

8、lswereculturedandequallydividedintocontrolgroup，modelg