酶标仪假阳性.doc

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1、一方面，酶标仪的优越性在于：灵敏度高，能达到0.001，对弱阳性标本检出率高；而人工判读受操作人员主观影响较大，用目测法判读结果时,样本颜色较浅(0.3-0.4),一般容易漏报，对弱阳性标本检出率低；相比之下酶标仪的阳性率显得高一些，甚至有时临床、实验室人员难以接受。　　另一方面，酶标仪与人工法相比，也有不足之处1、洗板：再先进的洗板机也有残留，而手工法则可避免这一点。严格按说明要求，手洗5--6遍就较为干净;而机洗要7--8遍基本可达手洗5遍的效果。较理想的洗板方式应为:先甩去血清和酶结合物,拍干,再上机洗7-8遍,每次洗板浸泡10-15秒。注意洗板次数和停留

2、时间不可无限制延长,若时间过长会洗脱酶结合物，造成弱阳性标本漏检。2、外界环境影响，如气温、电压、及仪器本身的保养1）酶标仪应配置稳压电源,防止电压波动对结果判读的影响。2）测量前预热3分钟。为延长灯光装置寿命,不使用时应将仪器开关断开。3）使用前先扫描空气,看读数是否在0.000-0.003,若变化较大,可能为灰尘阻碍光路,应关机清理灯光装置及室内环境。4）要正确输入参数,每次用前应调出看看,以防有误。5）测量时最好用双波长,以除去干扰因素。6）阴、阳性对照应作双孔,避免孔间差造成结果有误。7）个别孔目测颜色深,但酶标仪判读OD值偏低。原因可能是塑料板质量较差

3、,引起折光；也可能是仪器本身的报警机制不理想，要注意观察。　　总之，酶标仪敏感度高，假阳性率会高；酶标仪本身有缺陷，假阳性率会高，当然也可能漏检关键在于如何科学地设置与分析。　　每个实验室在应用酶标仪的时候,应设置合理的灰色区域,以保证结果的实用性。答2时间问题：　　加完终止液后，稳定5分钟再上机，结果比较稳定（一般要求30分钟内完成测定）正如nls2001酶免方法由于其原理的特性，存在很多可能影响结果的因素，虽然酶标仪洗板机的的出现使精确检测光密度和减少手工操作的影响，提高结果的可比性提供了帮助，但是在工作中我们也出现过一些类似的问题问题，在这里愿与大家分享。

4、酶免实验因为干扰因素多，其定性实验往往是通过比值形式得出结果的（即OD/cutoff）以减小批间差异。结果值的高低不仅决定于OD值的量，而且cutoff值对于最终判读结果的影响也是至关重要的，比如两次实验OD值都同为1，而一次的cutoff为0.5，另一次的为0.1，那么两次的结果就相差五倍！但是这两次实验的真实值真的就相差了5倍吗？恐怕事实不是这样的吧，因为酶免试剂盒里面所带的cutoff样品本身检测物量就是处于临界值，检测的OD值就低，再加上操作中的各种影响因素，虽然cutoff值的漂移绝对值变化不大，但是相对值确比较大，比如0.01变化到0.02，虽然只增

5、加了0.01，但是确可以导致结果2倍的变化。那么怎样克服这个问题呢，那就是设定cutoff的最低值下限，高于这个下限的cutoff值就直接按cutoff实际值计算，低于下限的cutoff就按最低值下限计算，一般的酶免软件软件都设计了这个功能，比如我们科室用的科华软件。不知道楼主科室是用的什么软件，是不是有这个功能，是不是用上了这个功能。由于我们科室实际工作中发现cutoff值常常上下波动，而且大多数时候都在设定cutoff值以下，所以我们一般都直接采用下限值参与计算，而每天记录cutoff值作为质控依据之一。另外，为结果设置一定的灰区也可以为避免忽阴忽阳的尴尬情

6、况，自己争取到一定的主动性，同时坚持每天进行酶标仪及免疫室的其他试剂的质控，正确合理操作仪器也都是提高免疫室工作质量，提高结果可比性的好办法。