大豆类黄酮生物合成美键酶CHS基因的克隆及表达分析-论文.pdf

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1、西北植物学报，2012，32(11)：2164—2168ActaBot．Borea1．-Occident．Sin．文章编号：1000—4025(2012)11-2164-05大豆类黄酮生物合成美键酶S基因韵克隆及表达分析单丽伟，汪勇，王美玲，王中华(i西北农林科技大学理学院，陕西杨陵712100；2西北农林科技大学农学院，陕西杨陵712lOO)摘要：根据查尔酮合成酶(CHS)基因DNA序列的保守区域设计了PCR引物，通过RT-PCR扩增从大豆叶片中克隆出3个参与类黄酮合成的CHS基因，分别命名为GmCHSI、GmCHS2和GmCHS3。在大豆基因组数据库进行同源比对，发现这3个基因分别与大豆基

2、因组上Gm08gl1610、Gm05g28610和Gm08gll520相对应，DNA序列一致性达95～98，推导氨基酸序列一致性达98以上。进化分析显示，大豆中3个CHS蛋白与决明、菜豆CHS蛋白亲缘关系较近。表达分析显示，这3个基因在不同品种间有表达水平的差异，这可能是不同大豆品种中类黄酮含量不同的重要原因之一。关键词：大豆异黄酮；类黄酮；查尔酮合成酶中图分类号：Q785；Q786文献标志码：ACloningandExpressionAnalysisofCHSGenesInvolvedintheBiosynthesisofFlavonoidsinSoybeanSHANLi—wei，WANGY

3、ong。，WANGMei—ling。，WANGZhong—hua(1CollegeofScience，NorthwestA&FUniversity，Yangling，Shaanxi712100，China~2CollegeofAgronomy，NorthwestA&FUniversity。Yangling，Shaanxi712100，China)Abstract：Inordertoclarifythebiosynthesisofflavonoidsinsoybeanseedsandtoknowthereasonforfla—vonoidscontentvariationamongdiffere

4、ntsoybean1ines，PCRprimersdesignedfromtheconservativedo—mainofChalconeSynthase(CHS)wereusedtoisolatetheCHSgenesfromsoybean1eavesbyRT—PCR．AStheresults．threeCHSg-enesinvolvedinthebiosynthesisoffiavonoidswereclonedoutandnamedasGCHSl。GCHS2andGmCHS3．AfterBLASTsearchagainstthesoybeangenomesequencingdatabas

5、e。thethreeCHSgenesareidenticalwithGmOSgl1610，Gm05g28610andGrn08gl1520，respectively．Se—quencesalignmentresultsindicatedthesethreeCHSgenesshared95～98identityonDNAsequence，and98identityonaminoacidssequence．6aminoacidsdifferencewasfoundamongthesethreeCHS．PhylogenicanalysisontheaminoacidsequencesofCHSfro

6、msoybeanandsomeotherplantsshowedthatthethreesoybeanCHSwerecloselyrelatedtoSennatoraandPhaseolusvulgaris．GeneexpressionanalysisshowedthatthethreeCHSgenesweredifferentlyexpressedbetweentwolines，whichmaybeoneofthemaiorreasonsleadstothevariationofflavonoidscontentsinseedsamongdifferentsoybeanlines．Keywo

7、rds：soybeanisoflavone；flavonoid；chalconesynthase大豆(Glycinemax)是中国和亚洲许多国家的多传统食物和动物饲料的主要成份。大豆中不仅富重要作物之一，在中国分布广泛，资源丰富，也是许含丰富的蛋白质，而且含有很强生物活性物质大豆收稿日期：2012—0702；修改稿收到日期：2012—09—21基金项目；西北农林科技大学引进人才科研启动基金；三秦学