资源描述：
《月季茎段初代培养的研究.doc》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在工程资料-天天文库。
1、物生物技术姓名：孟慧慧班级：10园艺教育学号：1335100013月季茎段初代培养的研究园艺教育100孟慧慧指导教师：邓盾、周玉丽摘要：为了研究不同激素组合，即细胞分裂素(6-BA)和生长素(NAA)对月季茎段初代培养的影响，本实验以MS为基本培养基，附加不同浓度的6-BA和NAA对月季茎段进行了初代培养研究。结果表明:初代培养阶段，以较高浓度的细胞分裂素和较低浓度的生长素配比对侧芽萌发具有较好地促进作用，适宜的培养基为MS+6-BA2.0mg/L+NAA0.25mg/L+琼脂5.5g/L+蔗糖30g/Lo关键词:月季；茎段；诱导；初代培养；月季，别名长春花、月月红、斗雪红、
2、瘦客等，蔷薇科蔷薇属植物，其花色艳丽、香味浓郁，是美化庭院和环境的主要花卉之一,被誉为'‘花中皇后”，是世界上著名的四大切花之一。当前，月季育种是花卉育种中最活跃的领域之一。月季通常采用抒插、嫁接和压条繁殖，但是一些名贵品种抒插不易生根，主要靠芽接繁殖，而芽接速度慢，因而造成优良品种的月季苗供不应求。应用组织培养技术可以大大缩短其增殖周期，达到快速繁殖优良品种的目的。试验以月季为材料进行了初代组织培养特性研究，试图找出适合该月季组培快繁的最佳激素配比的培养基。1材料与方法1.1供试材料外植体一般选取生长健壮的当年生月季枝条饱满而未萌发的侧芽。取材时间为11月中旬。4・2培养基
3、的配制MS培养基+6-BA0.5~2・0mg/L+NAA0・01~1・00mg/L+琼脂5.5g/L,蔗糖30g/L,配制后进行分装，而后加入不同浓度的激素组合,分别调整培养基的pH值至6.0o其中，6-BA选取1.0.2.0mg/L,NAA选取0.05.0、25、0.5、0.75mg/L,共八个组合，配制培养基2L,每组7瓶，共56瓶，标上1-8以示区分。1.3灭菌将配制好的培养基、滤纸、无菌水放入高压蒸汽灭菌锅内，关闭排气阀，打开电源，使压力1.1kg/cm2,温度121°C,灭菌30mino(lE确使用灭菌锅)1.4外植体处理剪取月季枝条中部茎段约0.5cm小段，在流水
4、下冲洗10-15分钟，再用洗洁精水浸泡0・5h,流水冲洗干净。茎段剪成单芽茎段，均置于无菌超净工作台备用。无菌条件下先用75%酒精浸泡30-40S,无菌水冲洗3次，弃掉。再用0/%升汞+两滴吐温80表面灭5~10min,无菌水冲洗3~4次。1.5接种将灭菌后的培养基摆在超净工作台上，剪刀、解剖刀、镶子放入灭菌器中，打开开关，将超净工作台打扫干净，打开风扇、紫外灯照射灭菌30mine之后进入接种室，接种时每瓶接1段，使侧芽与固体培养基表面齐平。1.6培养条件将接种后的容器置于光照培养架上进行培养,保持室内温度25.5°C,12h光暗交替培养。2•结果分析培养一个月后，统计诱导率
5、，并对所得数据进行统计处理。表■培养基中不同激素浓度对初代诱导的影响组数6-BA(mg/L)NAA(mg/L)诱导率（％）第1组1.00.0514.29第2组1.00.2528.57第3组1.00.542.86第4组1.00.7542.86第5组2.00.0557.14第6组2.0第7组2.0第8组2.00.2585.710.528.570.7514.29本次试验共8个处理，每组7瓶，共56瓶。接种外植体总数为56，污染总数为30,诱导出芽的总数为22，由此，污染率为53.57%,总诱导率为39.29。试验研究表明：第六组即NAA0.25mg/L+6-BA2.0mg/L组合激
6、素诱导率最高，对月季茎段的发芽率最高，即MS+6・BA2.0mg/L+NAA0.25mg/L+琼脂5.5g/L+蔗糖30g/L为月季茎段初代培养最佳诱导培养基。2•实验中存在的问题及可能的原因分析(1)众所周知，植物生长调节剂是植物新陈代谢中产生的天然化合物,它能以极微小的量影响到植物的多种生理生化活动。生长素的作用主要是促进细胞伸长和细胞分裂，诱导受伤的组织表面一至数层细胞恢复分裂能力,形成愈伤组织，促进生根等。细胞分裂素有诱导芽的分化、促进侧芽萌发生长的作用，当组织内细胞分裂素/生长素的比值高时诱导芽的分化，而本实验中，从理论上说，第五组的诱导率应该最高，但实际上第六组的
7、诱导率却最高。(2)激素浓度的选择范围太小，浓度跳跃过大，不能很好说明问题(3)污染数较多，可能与外植体的取材，消毒不彻底有关(4)试验中出现外植体在培养过程中未成活和培养基褐化的情况(5)处理数较少，不能全面解释不同浓度组合对外植体初代培养的影响2•实验中污染来源分析及防止措施污染来源：(1)外界环境采取的外植体本身携带的污染较多(2)对外植体消毒灭菌不彻底(3)植物内生菌污染(4)接种器具及培养基消毒不彻底防止措施：(1)对外植体进行彻底消除(2)加入抗氧化剂防止褐化(3)接种器具及培养基要进行高温
