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时间:2019-02-25
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1、“海湾红宝石”李茎段离体培养研究“海湾红宝石"李茎段离体培养研究摘要李(Prunussalicina)为我国重要的多年生落叶果树,果实色、香、味俱佳,栽培历史悠久。但李具有童期较长、雌蕊败育率高、遗传高度杂合及易受病毒病危害等特性。李离体培养及再生技术体系的建立,不仅是苗木快速繁殖和无病毒苗木培育的新途径,而且也是开展李生物技术研究如种质资源离体保存、提高育种效率及遗传转化和创新种质资源等技术的基础。本研究以“海湾红宝石”李(PrunussalicinaLindl.CVoGulf-ruby)茎段为外
2、植体进行离体再生体系的建立,着重研究了“海湾红宝石”李茎段培养的最佳取材时期、消毒方法、培养基配方和培养程序,以及影响快速繁殖的关键性因素,初步建立了一套较为系统完整的快速繁殖技术体系。主要研究结果如下:1.通过周年外植体消毒试验,结果表明4"---'5月为最佳取材时期,此时外植体正处于春季萌发生长阶段,带菌较少,成活率高,易诱导成苗。此时期外植体采用70%酒精30s+(0.5%NaCIO+吐温.202"---'3滴)12min消毒效果较好。2.若要进行周年生产,应针对不同的外植体取材时期采用不同的
3、消毒方法:生长前期(4"--'5月)外植体采用70%酒精30s+(0.5%NaCIO+吐温.202"---3滴)12min消毒效果较好;生长后期(6~11月)外植体采用70%酒精30s+(1%NaCIO+吐温.202~3滴)15min消毒效果较好;休眠期(12"--'3月)外植体采用70%酒精30s+(5%NaCl0+吐温.202"---3滴)15min消毒效果较好。3.经过筛选,初代培养适宜的培养基配方为:WPM+IBA0.05"--'0.1mg/L+BAO.5"--'1.0mg/L+葡萄糖30∥
4、L+琼脂5∥L+Vc1.0g/L。黑暗或弱光条件下(外植体用报纸覆盖)培养5d后转移到白光下培养,能达到较为满意的效果。4.继代培养中以增殖为目的时,适宜的培养基配方为WPM+IBA0.05"---'0.1mg/L+BA0.2mg/L+KT0.3mg/L+葡萄糖30g/L+琼脂5∥L+Vc1.Og/L+CH1.0∥L。末次继代(生根前)时,为加快嫩茎伸长生长为诱导生根做准备,同时考虑到节约成本,适宜的壮苗培养基配方为WPM+IBA0.05"-'0.1mg/L+BA0.3mg/L+葡萄糖30∥L+琼脂
5、5∥L+Vc1.0∥L+CH1.0∥L。5.生根培养中,适宜的培养基配方为:1/2MS+IBA0.2"-'0.5mg/L+蔗糖15∥L+PG20""-'40mg/L。暗培养放置7d后转移到白光下培养,能达到较为满意的效果。6.炼苗移栽试验中,将生根苗从恒温培养室移出,封口膜半开置于自然光下炼苗2d后,去封口膜,在培养基中加入少量蒸馏水后继续在自然光下炼苗3d,再将生根苗取出用温水洗净,移入基质中。移栽基质:菜园土:珍珠岩:蛭石=l:l:“海湾红宝石”李茎段离体培养研究1(v:v:v)。关键词:“海湾
6、红宝石”李;茎段;离体培养3“海湾红宝石”李茎段离体培养研究StudiesonStemSegment/nVitroCultureofChinesePlum(PrunussalicinaLindl.CV.Gulf-ruby)AbstractPrunussalicina,acenturies-oldcultivatedhistorytree,isonekindofimportantfruittreesinChina,anditsfruitshavegoodcolor,sweet-smellingands
7、apor.However,plumpossessesnotonlylongerjuvenilitybutalsohigherpistilsterileandheterozygosity.Plumisofteninfectedbyvirus.Advancesintissuecultureandgenetictransformationofplumhaveofferedtheopportunitytoacquirethenewgermplasmresources,shortenthebreedingcy
8、cleandproducetheseedingsfleefromtheviruses.TheobjectiveofthepresentstudywastoestablishtheregenerationsystemsofChineseplum(PrunussalicinaLindl.CV.Gulf-ruby).Theimportantfactorssuchassamplingseason,methodsofsterilization,componentsofmediu
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