湖北麦冬茎尖离体培养与植株再生研究.pdf

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1、2004年第9期湖北麦冬茎尖离体培养与植株再生研究别运清,丁芹(襄樊职业技术学院生物工程系,湖北襄樊441021)摘要:研究了湖北麦冬茎尖离体组织培养和植株再生过程,结果表明:湖北麦冬茎尖在MS+6-BA2.0mg/L+NAA0.2!0.5mg/L的培养基中能完成愈伤组织的诱导、增殖与分化,分化的小苗在1/2MS+NAA0.5mg/L的培养基中生根而完成植株再生过程。盆栽试验表明,湖北麦冬茎尖组培苗具有很大的增产潜力。关键词:湖北麦冬;组织培养;盆栽试验中图分类号:S567.23+2文献标识码:A文章编号:1004-3268(2

2、004)09-0053-03ShootTipiwoitroCultureandplantletRegenerationofLirioPesPicataoar.ProliferaBIEYun-ging,DINGgin(DepartmentofBioengineering,XiangfanvocationalandTechnicalCollege,Xiangfan441021,China)Abstract:Studiesontheprocessofshoottipiwoitrocultureandplantletregenerati

3、onofLirioPesPicataoar.ProliferashoWedthattheprocessofinductionpropagationanddifferentiationofcal-lusfromtheshoottipWasobservedontheMSmediumWith2.0mg/L6-BAand0.2!0.5mg/LNAA.Therootingofdifferentiatedshootsandplantletregenerationcouldbefinishedonthe1/2MSmediumWith0.5mg

4、/LNAA.Thepotbio-controltestresultsshoWedthattheshootsoftissueculturehadgreatpotentialityofincreaseinproduction.Keywords:LirioPesPicataoar.Prolifera;Tissueculture;Thepottest湖北麦冬(LirioPesPicata(Thunb)Lour.1材料与方法oar.ProliferaY.T.Ma)主要栽培于汉水流域的襄阳、谷城、老河口等县市,是《中国药典》(19951.1

5、试材来源年版)收载的麦冬类药用植物之一。它以块根入供试湖北麦冬植株取于“湖北麦冬GAp试验药,具有养阴生津、清心润肺之功效,《神农本草基地”(湖北省襄樊市欧庙镇)。经》将其列为上品。由于湖北麦冬历来都是采用1.2茎尖的剥离和诱导培养基的筛选无性分株繁殖,容易导致种性退化和病毒积累。将湖北麦冬植株洗净,切去根,去掉叶片,只为了解决这一问题,笔者进行了湖北麦冬的茎尖留包裹茎尖的嫩叶,再用自来水冲洗约30min,离体组织培养研究,成功地完成了植株再生过程,在超净工作台上先用75%的酒精处理约30s,再并对组培苗和盆栽苗进行了初步的盆栽

6、对比试转入0.1%~gCl溶液处理8!10min,无菌水洗2验,现报道如下。5!6次,以无菌滤纸吸干表面水分,在解剖镜下收稿日期:2004-06-02基金项目:湖北省“十五”重大科技攻关项目(2001ZZ304Z01Z02Z03)作者简介:别运清(1969-),男,湖北仙桃人,讲师,主要从事植物组织培养教学与研究工作。·53·河南农业科学小心剥出茎尖,用利刀切取0.5~0.7mm大小的10盆,每盆栽1株苗,常规管理。观察单苗分蘖茎尖(带2~3个叶原基),迅速接种于下述4种诱数和块根数。导培养基中,①MS+6-BA2.0mg/L+

7、NAA以上培养基均附加3%蔗糖,0.6%~0.7%2.0mg/L;②MS+6-BA2.0mg/L+NAA1.0琼脂粉,调节p~5.8。在1.1kg/cm2压力下mg/L;③MS+6-BA2.0mg/L+NAA0.5(121C)灭菌20~25min。mg/L;④MS+6-BA2.0mg/L+NAA0.22结果与分析mg/L。每种培养基接种20个茎尖,每瓶1个,共80瓶,平均分为2组:一组一直光照培养,光照强2.1不同培养基愈伤组织诱导效果度2000~2500lx,每天12h光照;另一组暗培试验只进行了6-BA与NAA的不同浓度配养

8、7d后转入光照培养。培养温度均为25C左合的研究。接种的茎尖在①~④号培养基中培右。观察各培养基愈伤组织诱导和分化情况。养,20d后均可形成愈伤组织。愈伤组织的诱导1.3愈伤组织的增殖与分化与分化情况见表1。从中可以看出,在①、②号培将在上述培养基上生长良好的愈

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