桃砧木毛桃离体培养和植株再生的研究

《桃砧木毛桃离体培养和植株再生的研究》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、华中农业大学硕士学位论文桃砧木毛桃离体培养和植株再生的研究姓名：白芝兰申请学位级别：硕士专业：果树学指导教师：李国怀201206桃砧木毛桃叶片离体培养与植株再生的研究摘要建立高效稳定的离体再生体系是进行遗传转化的基础和前提。桃的离体再生较为困难，很大程度上阻碍了桃现代生物技术育种的进程。本试验以南方桃区主要砧木毛桃(Prunuspersica)为试材，利用茎段离体培养获得的无菌苗叶片为外植体，通过对基本培养基类型、激素种类和浓度配比，碳源和暗培养时间等一系列因素的研究，初步建立了桃砧木毛桃叶片离体再生和愈伤组织诱导、保存及植株再生体系，为桃后续的遗传转化研究奠定了一定的基础。主要研究结

2、果如下：1．2010年5-6月进行毛桃茎段腋芽诱导，萌发率可达76．6％，且生长状况良好。毛桃试管苗较适宜的增殖培养基为：LP基本培养基+6．BA0．75mg／L+IBA0．30mg／L+腺嘌呤3．00mg／L+蔗糖30．0g／L+琼脂6．8∥L，pH为5．8-6．0，每隔30d左右继代一次。2．在毛桃叶片植株再生时先进行21d的暗培养后更换到新鲜培养基进行光培养，暗光培养时培养基均为：SH基本培养基+TDZ3．0mg／L+NAA0．3mg／L+蔗糖30．0g／L+琼脂6．0gm，pH为5．8—6．0，最高再生率可达11．67％。3．毛桃试管苗较适宜的生根培养基为：1／2LP基本培养基

3、+IBA1．0mg／L+NAA0．1mg／L+蔗糖20．0g／L+琼脂6．8gm，pH为5．8—6．0。培养30d生根率可达73．34％，平均每棵试管茁生根条数为3条，平均根长为4．81cm。4．毛桃叶片愈伤组织诱导较佳培养基为：LP基本培养基+6．BA1．0mg／L+2，4一D3．0mg／L+AgN030．5mg／L+蔗糖30．0g／L+琼脂6．0g／L，pH5．8—6．0，选取继代30d左右的毛桃试管苗的幼嫩茎段(不带腋芽)或叶片作为外植体，暗培养21d后转移至光培养。5．毛桃愈伤组织继代保存的较佳培养基为：LP基本培养基+2，4一D1．5mg／L+CH0．4g／L+CA3．0g／

4、L或PVP3．0gin+蔗糖30．0g／L+琼脂5．8∥L，pH5．8．6．0，每28d继代一次，持续暗培养进行保存。关键词：毛桃：离体培养；愈伤组织；植株再生华中农业大学2012届硕士研究生学位论文AbstractAnefficientandstableregenerationsystemisapre-requisiteforplantgenetictransformation．Peachisdifficulttoregeneratefrominvitro—culturedexplants，whichhaslargelyhinderedthedevelopmentofnewvarie

5、tiesusingthetoolsofmodembiotechnology．Inthisstudy,thepeachrootstock(Prunuspersica)widelycultivatedinSouthernChinawasusedasexperimentmaterial．Usingtheleavesofasepticplantletsderivedfromstemsegmentasexplantsandplanttissueculturemethod，effectsofdifferentbasicmedium，plantgrowthregulatortypesandconte

6、nt，carbonsourceanddarkperiodonadventitiousshootregenerationandcallusinduction，conversationandregenerationwereinvestigated．Thisstudypreliminarilyestablishedallinvitroregenerationsystemfrom‘maotao’，whichlaidthefoundationforfurthergenetictransformationattempts．Themainresultswereasfollows：1．InMaytoJ

7、une2010，theinductionofaxillarybudsWasperformedviainvitroshootsegmentculture．Thegerminationpercentagewasupto76．6％andthebudshadastronggrowthpotential．Themostappropriatemediumforproliferationof‘maotao’WasLPmediumsupplementedwit