地胆草腋芽茎段的离体培养研究.doc

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1、地胆草腋芽茎段的离体培养研究摘要为了探索地胆草组织培养的方法，试验以无菌的地胆草腋芽茎段为外植体，研究6-BA和NAA不同激素水平配比对地胆草芽的诱导和继代增殖的影响。结果表明，适宜于地胆草芽诱导分化的培养基配方为MS+6-BA1.5mg/L+NAA0mg/L,繁殖系数为2.6倍，适宜于地服草芽继代增值的培养基配方为MS+6-BA0mg/L,繁殖系数为2.3倍。关键词地胆草；腑芽茎段；离体培养中图分类号R282.71文献标识码A文章编号1007-5739(2014)07-0098-02StudyonStemSegmentWithAxillaryBudCultureofElephanto

2、pusscaberL.invitroCHENGJing1GAOHong-hua1*GUXiao-chuan1ZHENGDing-hua1YUShu-hua2ZHANGYi-shan2FANGao-Jun1WANGXiu-quan1ZHANGZhi-yang1LIYan1(1RubberResearchInstitute,ChineseAcademyofTropicalAgriculturalSciences,DanzhouIlainan571737；2ChineseAcademyofTropicalAgriculturalSciences)AbstractToexploretheeff

3、ectsofdifferent,timeofhormonescombinationandconcentrationsinvitrocultureofElephantopusscaberL.,usingsterileElephantopusscaberL.stemwithaxillarybudasexplants,effectofinduction且ndmulitiplicationofElephantopusscaberLindifferentlevelsofhormone6~BAandNAAratiowasstudied・Theresultsshowedthat,thebetters

4、uitableforshootinductionofexplantswascultureofMS+6-BA1.5mg/L+NAA0mg/L,propagationcoefficientwas2.6times,andthebettersuitableforsecondarycultureofexplantswasculturemediumofMS+6-BA0mg/L,propagationcoefficientwas2.3times・KeywordsElephantopusscaberL・；axillarybud；cultureinvitro菊科地胆草属植物地胆草(Elephantopu

5、sscaberL.)为我国长江以南，尤其是华南地区常用的民间药物。港澳地区习称土蒲公英、地胆头。台湾民间又称灯竖朽、丁茄芋，多用于治疗胃病、肝炎、肾炎、支气管炎等［1］。西南地区少数民族民间亦喜用此药用植物，如《中国民族药志》记载傣、苗、瑶、壮、黎、侗、景颇、拉枯、基诺、布依族人民用此药治疗才痛、痢疾等病。东南亚国家传统医学文献中均有使用此种植物不同部位治疗发热、咳嗽、关节炎、水肿筹的记载。南美洲的巴西民间认为它具有利尿、抗炎功效，非洲的尼口利亚、马达加斯加土著人则用此药作解热剂，治疗痢疾、关节炎等疾病［2］。因其较高的药用价值，冃前在民间应用广泛，其屮在广东、海南和港澳台地区作为药用

6、食材，使用非常普遍，但由丁长期进行营养繁殖，不仅用种量人，扩繁速度慢，还因连续种植使病毒不断积累导致种性退化，使其种植面积和数量逐年下降，严重影响了质量和产量的提高［3-4］o本文利用植物组织培养技术建立地胆草离体再生体系，为加快地胆草种苗繁殖速度，提供一定的理论依据［5-6］o1材料与方法1.1试验材料1.1.1材料处理。12月待地胆草种子全部成熟、果盘变干以后，用剪刀剪取果盘，进行收集。将收集好的果盘放在5mm筛孔的筛子上用手进行揉搓，使种子和果盘分离，然后再用2mm筛孔的筛子，将更纯净的种子筛出。将收集好的种子装入密封袋中，排掉空气密封好，放在黑暗干燥的实验柜中保存待用。外植体的

7、灭菌：取成熟饱满的地胆草种子，用流动水冲洗10min,在超净台上用75%酒精浸泡1min,用0.1%升汞灭菌15min,无菌水漂洗5〜7次，然示用解剖针剥开种子顶尖部位，接种在盛有MS培养基的培养皿中；将种子发芽的地胆草植株接种到盛有MS培养基的培养瓶中培养50d左右。芽的诱导分化：将培养出來的地胆草无菌苗，切除叶片，用解剖刀将地胆草截取成2cm左右带腋芽的茎段（图1）,注意不能伤到芽点，放在无菌滤纸上吸干后接入含6-BA和NAA的MS培养基屮