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1、园艺学报1996,23(3):264)268ActaHorticulturaeSinica*植物激素对蚕豆离体茎段自体嫁接的影响**刘美琴王幼群杨世杰(中国农业大学生物学院,北京100094)提要植物激素的浓度与配比影响着蚕豆离体嫁接系统中砧木与接穗间维管束桥的形成。植物激素浓度低时,没有维管束桥的分化,且易褐变坏死;浓度适宜(IAA:lmg/L,KT:012mg/L)时,砧木与接穗间的维管束可直接连通;浓度继续增高时,只有30%的嫁接组合有维管束桥的分化,呈分支状分布于茎的棱角处,而其余70%的嫁接组合砧穗间没有维管束桥的分化,从而使嫁接亲和力
2、下降。关键词蚕豆;离体茎段嫁接;植物激素;维管束桥植物嫁接技术已广泛应用于园艺植物生产,然而关于嫁接亲和性的机制至今仍存在很[4]多分歧和疑点。Parkinson和Yeoman于1982年提出了植物离体茎段嫁接方法,王幼群[1、2]对有关离体嫁接的组织学和细胞学方面做过报道,此外国内外对这方面的研究还很少。离体嫁接是一个可控的实验系统,本文采用离体茎段嫁接方法进行研究,为揭示嫁接亲和性机制提供依据。1材料和方法111材料蚕豆(ViciafabaL.)购于中国农业大学园艺系。28e下催芽后盆栽,温室培养,部分材料用完全营养液进行水培。112嫁接方法
3、按Parkinson和Yeoman(1982)的方法稍加改进。采用MS培养基。将培养基分为A、B两部分,均为150mL,pH为518,激素和其它成分配比如表所示。当蚕豆长出第5~6片真叶时,切取直径合适的茎段,在灭菌过的熔解石蜡中浸一下,用70%酒精和7%次氯酸钠溶液依次消毒,无菌水冲洗,备用。将灭菌过的A、B培养基倒入培养皿中,凝固后把分隔A、B培养基的铝块取出。将相当于接穗和砧木的两个茎段拼接在一起,用塑料管固定,置于A、B培养基之间,培养皿周围用Parafilm膜封严,上方为A培养基,下方为B培养基(图版,1)。温度25e,光强约2000l
4、x,光照时间16小时。113甘油透明法按李正理(1978)方法。114组织学细胞学观察利用第8号培养基组合,嫁接后第2、4、6、8、10、12、18天切取嫁接面附近的砧穗组织,用多聚用醛)戊二醛固定,锇酸后固定,酒精系列脱水,Spurr树脂包埋,LKBIII型超薄切片机上切片,半超薄切片在OLYMPUS-BH-2型显微镜下观察,超薄切片用JEM-100S和JEM-100CX观察。收稿日期:1995-12-25;修回日期:1996-03-20。*国家自然科学基金资助项目。**现在中国科学院生态环境研究中心工作,北京100085。3期刘美琴等:植物激
5、素对蚕豆离体茎段自体嫁接的影响265表培养基配方2结果TableCulturemediumingredients编号生长素激动素蔗糖琼脂211植物激素对接穗和砧木间维管束桥分CulturemediumIAAKinetinSucroseAgar化的影响number(mg/L)(mg/L)(%)(%)在培养基编号1~3组合中,第7天嫁1A0125010101041120B)0101)1120接面稍膨大。第4~7号组合,第5天嫁接2A0125010101042100面附近有少量愈伤组织形成,易褐变,第15B)0101)2100天时成活率只有10%。第8
6、号组合,嫁接后3A0125010201041120B)0102)1120第2天嫁接面处稍微膨大;第3天,嫁接面4A0125010101042100明显膨大,但砧木与接穗仍未粘合在一起;B)0101)21005A0125010101171150第6天,50%~60%的嫁接组合已愈合在一B)0101)1150起;第10天,嫁接面处的愈伤组织呈白色,6A0150010101171180B)0101)118080%的嫁接组合已完全愈合,不易分开;第7A017001110117118012天嫁接面处的愈伤组织呈淡黄绿色,愈B)0111)1180合牢固;接穗
7、形态学上端的愈伤组织较多,8A1100012001171180B)0120)1180砧木形态学下端的愈伤组织较少(图版,9A01140130011711802)。第9号组合嫁接成活率为98%。与第8B)0130)1180号组合相比,接穗形态学上端和砧木形态学下端的愈伤组织普遍较少。通过甘油透明可清晰地看到,嫁接后第15天第8号组合砧木与接穗的维管束直接连通(图版,3a)。维管束桥没有分支,有的呈弯曲状连通。除4个棱角以外,中间部位的维管束也直接连通。第9号组合成活率为98%~100%。维管束连通的嫁接组合只有30%,砧穗间维管束桥极细,只在茎段的
8、棱角处偶尔发现,呈分支状,中间部位没有维管束桥的分化(图版,3b)。其余嫁接组合没有维管束桥的分化(图版,3c)。212组织学细胞学观察
