不同蓝莓品种茎段初代培养及增殖能力比较.doc

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1、不同蓝莓品种茎段初代培养及增殖能力比较     蓝莓(Blueberry)学名越橘，属杜鹃花科越桔属浆果类灌木，是具有较高经济价值和广阔开发前景的新兴树种。蓝莓果实具有防止脑神经衰老、增强心脏功能、明目及抗癌等独特功效，被国际粮农组织列为人类五大健康食品之一。正是由于蓝莓独特的风味及营养保健价值，其果实及产品风靡世界，供不应求，在国际市场上售价昂贵。2010年，我国国栽培蓝莓面积5000hm2，产量1000t，主要分布在吉林、山东、江苏、浙江、上海、贵州等省，经济效益显著，开创了一条特色高效农业发展之路。湖北省蓝莓商业

2、化种植刚刚起步，但是本省地处我国中部，地理和气候资源丰富多样，适宜蓝莓种植的面积大。湖北省农业科学院果树茶叶研究所2001年开始蓝莓引种研究，从国内科研院校以及美国引进北高丛蓝莓、南高丛蓝莓、兔眼蓝莓等品种50余份，为品种筛选和新品种培育提供了丰富资源。   植物离体快繁是植物组织培养在生产上应用最广泛、产生较大经济效益的一项技术。离体快繁具有繁殖系数大、周年生产、繁殖速度快、苗木整齐一致等优点，能使新品种在短时间内繁育出大量优质苗木，并保持品种的优良特性，加速优良品种在生产上的推广应用。本研究利用组织培养技术对引进的

3、蓝莓品种进行离体培养及快速繁殖研究，为蓝莓在湖北省的推广应用提供技术支持。1  材料与方法1.1  材料    供试材料为湖北省农业科学院果树茶叶研究所蓝莓品种圃3年生蓝莓的一年生枝条，所有品种均从美国奥本大学引进。1.2方法    试验于2012年4-12月在湖北省农业科学院果树茶叶研究所实验室进行。1.2.1  茎段初代培养  选取生长健壮、无病虫害的枝条，剪取枝条上部7-8cm。枝条取回后，去叶片，流水冲洗lh。在超净台上先用70%酒精浸泡30s，0.1%HgC12消毒6-8min,无菌水冲洗5次，每次5min，

4、剪成单芽茎段后，接种到初代培养基上，黑暗培养2-3d。所用基本培养基为改良WPM培养基，ZT2mg/L，琼脂7.0g/L，蔗糖30.0g/L，pH5.4，121℃灭菌20min．25%下每天光照14h，光强1900lx，继代周期40d。1.2.2继代增殖培养  初代培养的不定梢长到3~4cm时，剪成1-2cm茎段接在继代培养基上。继代4次后，调查不同蓝莓品种的生长及增殖情况。培养基及培养条件同初代培养。1.3调查内容和方法    外植体茎段接种40d后，统计芽诱导率并记载初代幼苗生长情况。继代培养45d后统计增殖率及幼

5、苗生长情况。芽诱导率=萌芽茎段数／}妾种茎段数×100%   增殖率=生成不定芽的数量／接种茎段数2  结果与分析2.1  不同蓝莓品种茎段芽诱导情况    无菌培养体系的建立是蓝莓组织培养的基础。由于蓝莓初代培养茎段均从田间获得，蓝莓成年茎段培养体系的不成熟，制约着相关生物技术在蓝莓生产上的应用，而进行茎段培养的第一步就是取得大量的无菌材料。4-5月份，在3年生蓝莓树上取材，污染率及褐死率较低，采用改良WPM培养基，不同蓝莓品种茎段均成功诱导出不定芽，品种芽诱导率及萌发情况存在较大差异。北高丛蓝莓茎段接种后7d，已有

6、部分品种芽萌出，其中伯克利、蓝丰、公爵、北陆萌芽早，且萌芽率较高，萌芽率分别为91.6%、83.3%、85.0%、90.0%，伯克利带芽茎段部分诱导出丛生芽，公爵、北陆不定芽生长粗壮。茎段诱导率较低的为泽西和蓝鸟，芽诱导率分别为51.7%、43.3%。南高丛蓝莓的布莱登萌芽率较高，茎段接种后7d开始萌芽。兔眼蓝莓茎段接种后10-14d，不定芽萌出，灿烂、顶峰、圆蓝、巨丰、巴尔德温萌芽率较高，分别为88.3%、91.7%、88.3%、80.0%、93.3%，不定芽生长健壮，叶片较大。茎段诱导率较低的为爱丽丝蓝，仅48.3

7、%。2.2  不同蓝莓品种的增殖情况    在改良WPM培养基+2mg/LZT的增殖培养基中，不同种群蓝莓品种在生长及增殖过程中表现出较大的差异。部分品种在继代增殖培养的第1代就表现出良好的增殖性，易形成丛生芽，部分品种需经过2-3次继代，才能增殖。表2中为继代4次不同蓝莓品种的生长及增殖情况。在北高丛蓝莓中，伯克利、公爵、北陆的增殖率较高，分别为7.6、6.7和6.5，泽西增殖率低为2.2：南高丛蓝莓中，布莱登增殖率高为7.0，奥尼尔增殖率较低为3.2。在兔眼蓝莓中，顶峰、巨丰和巴尔德温的增殖率较高，分别为5.7、5

8、.5、6.4，杰兔、梯芙蓝增殖率低，分别为3.3、2.8。北高丛蓝莓组培苗长势中庸或健壮，生长直立：兔眼蓝莓植株较粗壮、部分存在分枝，叶片大，色绿，节间短。南高丛蓝莓长势较粗壮、直立。3讨论    植物离体培养中，外植体的基因型和生理状态、培养基、培养条件等是影响离体形态发生的主要因素。不同物种和同一物种的不同基因型，其形态发生能