富产琥珀酸米曲霉菌株的诱变选育_李宁.pdf

《富产琥珀酸米曲霉菌株的诱变选育_李宁.pdf》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在教育资源-天天文库。

1、2015Vol.34No．1·72·SerialNo．275ChinaBrewingResearchReport富产琥珀酸米曲霉菌株的诱变选育李宁，马莉岷，战伟超，任高飞，林剑*（烟台大学化工制造省级重点实验室，山东烟台264005）摘要：以米曲霉AS3.042为出发菌株，经过紫外线诱变后选育出一支琥珀酸产量高的菌株AS-4。以AS-4为出发菌株，采用亚硝基胍诱变后得到一支富产琥珀酸米曲霉诱变菌株ASC-5。该菌株经摇床培养后，琥珀酸产量达到3.60g/L，相同条件下为出发菌株的371倍，为单用紫外线诱变后的菌株AS-4的13.43倍。

2、关键词：米曲霉；紫外线诱变；亚硝基胍诱变；琥珀酸中图分类号：TS201.3文献标识码：A文章编号：0254-5071（2015）01-0072-04doi:10.11882/j.issn.0254-5071.2015.01.018Mutationscreeningofsuccinicacid-producingAspergillusoryzaeLINing,MALimin,ZHANWeichao,RENGaofei,LINJian*(ProvincialKeyLaboratoryofChemicalIndustryManufacture

3、,Yantai264005,China)Abstract:UsingAspergillusoryzaeAS3.042asoriginstrain,ahighsuccinicacidproducingstrainAS-4wasscreenedbyultravioletmutation.ThenthestrainAS-4wasinducedbynitrosoguanidinemutation,andastrainASC-5richinsuccinicacidwasobtained.Aftershakecultivation,theyield

4、ofsuccinicacidwas3.60g/L,whichwas371timeshigherthantheoriginstrainand13.43timeshigherthanstrainAS-4inducedbyultravioletmutationonly.Keywords:Aspergillusoryzae;UVmutagenesis;nitrosoguanidinemutagenesis;succinicacid琥珀酸二钠又名干贝素，是干贝中的主要鲜味成造生产的菌株，为提高目前我国酱油中琥珀酸的含量、改[12]份，广泛用于方便

5、面海鲜汤料、肉制品、酱油、海鲜类产品善我国酱油品质提供良好的菌种资源。[1]等食品及其加工领域。琥珀酸二钠作为调味品，其钠盐1材料与方法[2]可改善豆酱、酱油等佐料的口味；特殊的贝类滋味，是鲜1.1材料与试剂味和谐过渡的纽带；可与其他鲜味剂以一定的比例混合1.1.1菌种与试剂使用，从而达到鲜味相乘的效果；琥珀酸二钠在调味的同米曲霉（Aspergillusoryzae）AS3.042：烟台大学生物工时，还能缓和其他调味品的刺激（如咸味），产生好的口感；程实验室保藏。琥珀酸二钠渗透性强，是不挥发性有机酸，具有一定的防亚硝基胍（nitroso

6、-guanidin，NTG）（分析纯）：美国Sig-[3-5]腐作用。因此，琥珀酸二钠本身的风味特点及与其他食ma公司；丁二酸：上海化学试剂站中心化工厂；溴甲酚绿：品配料的良好协同作用，为其在调味食品中应用提供了上海化学试剂总厂；葡萄糖：潍坊盛泰药业有限公司；蔗[6]更广阔的领域和前景。糖：天津市光复科技发展有限公司；硝酸钠：天津市巴斯夫目前我国酱油生产中普遍使用的米曲霉AS3.042或化工有限公司；氯化钾：大连无机化工厂；硫酸镁：金山县[7]其诱变菌株，在发酵过程中只能产生微量的琥珀酸，从兴塔化工厂；亚硫酸铁：烟台三和化学试剂有限公司

7、；磷酸[8]而导致成品中的琥珀酸浓度很低。目前发酵法生产食用二氢钾：天津市科密欧化学试剂研发中心。级琥珀酸还未实现规模化和产业化，生产成本限制了其1.1.2培养基在酱油中的使用，最重要的是直接在酱油中添加琥珀酸（1）斜面培养基采用马铃薯葡萄糖琼脂（potatodex-[9-11]也难以被消费者接受。而琥珀酸作为酱油中的呈味物troseagar，PDA）培养基：马铃薯200g，葡萄糖20g，琼脂质，对于酱油的品质有着重要的意义。以目前我国酱油酿20g，水1000mL，pH值自然。0.1MPa灭菌20min。造生产使用的米曲霉AS3.042

8、为出发菌株，经过紫外线和（2）筛选培养基采用查氏培养基：蔗糖3g，NaNO30.3g，亚硝基胍诱变，以期筛选出一支富产琥珀酸、适合酱油酿K2HPO40.1g，KCl0.05g，MgSO40.05g，FeSO