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《富产琥珀酸米曲霉菌株的诱变选育_李宁.pdf》由会员上传分享,免费在线阅读,更多相关内容在教育资源-天天文库。
1、2015Vol.34No.1·72·SerialNo.275ChinaBrewingResearchReport富产琥珀酸米曲霉菌株的诱变选育李宁,马莉岷,战伟超,任高飞,林剑*(烟台大学化工制造省级重点实验室,山东烟台264005)摘要:以米曲霉AS3.042为出发菌株,经过紫外线诱变后选育出一支琥珀酸产量高的菌株AS-4。以AS-4为出发菌株,采用亚硝基胍诱变后得到一支富产琥珀酸米曲霉诱变菌株ASC-5。该菌株经摇床培养后,琥珀酸产量达到3.60g/L,相同条件下为出发菌株的371倍,为单用紫外线诱变后的菌株AS-4的13.43倍。
2、关键词:米曲霉;紫外线诱变;亚硝基胍诱变;琥珀酸中图分类号:TS201.3文献标识码:A文章编号:0254-5071(2015)01-0072-04doi:10.11882/j.issn.0254-5071.2015.01.018Mutationscreeningofsuccinicacid-producingAspergillusoryzaeLINing,MALimin,ZHANWeichao,RENGaofei,LINJian*(ProvincialKeyLaboratoryofChemicalIndustryManufacture
3、,Yantai264005,China)Abstract:UsingAspergillusoryzaeAS3.042asoriginstrain,ahighsuccinicacidproducingstrainAS-4wasscreenedbyultravioletmutation.ThenthestrainAS-4wasinducedbynitrosoguanidinemutation,andastrainASC-5richinsuccinicacidwasobtained.Aftershakecultivation,theyield
4、ofsuccinicacidwas3.60g/L,whichwas371timeshigherthantheoriginstrainand13.43timeshigherthanstrainAS-4inducedbyultravioletmutationonly.Keywords:Aspergillusoryzae;UVmutagenesis;nitrosoguanidinemutagenesis;succinicacid琥珀酸二钠又名干贝素,是干贝中的主要鲜味成造生产的菌株,为提高目前我国酱油中琥珀酸的含量、改[12]份,广泛用于方便
5、面海鲜汤料、肉制品、酱油、海鲜类产品善我国酱油品质提供良好的菌种资源。[1]等食品及其加工领域。琥珀酸二钠作为调味品,其钠盐1材料与方法[2]可改善豆酱、酱油等佐料的口味;特殊的贝类滋味,是鲜1.1材料与试剂味和谐过渡的纽带;可与其他鲜味剂以一定的比例混合1.1.1菌种与试剂使用,从而达到鲜味相乘的效果;琥珀酸二钠在调味的同米曲霉(Aspergillusoryzae)AS3.042:烟台大学生物工时,还能缓和其他调味品的刺激(如咸味),产生好的口感;程实验室保藏。琥珀酸二钠渗透性强,是不挥发性有机酸,具有一定的防亚硝基胍(nitroso
6、-guanidin,NTG)(分析纯):美国Sig-[3-5]腐作用。因此,琥珀酸二钠本身的风味特点及与其他食ma公司;丁二酸:上海化学试剂站中心化工厂;溴甲酚绿:品配料的良好协同作用,为其在调味食品中应用提供了上海化学试剂总厂;葡萄糖:潍坊盛泰药业有限公司;蔗[6]更广阔的领域和前景。糖:天津市光复科技发展有限公司;硝酸钠:天津市巴斯夫目前我国酱油生产中普遍使用的米曲霉AS3.042或化工有限公司;氯化钾:大连无机化工厂;硫酸镁:金山县[7]其诱变菌株,在发酵过程中只能产生微量的琥珀酸,从兴塔化工厂;亚硫酸铁:烟台三和化学试剂有限公司
7、;磷酸[8]而导致成品中的琥珀酸浓度很低。目前发酵法生产食用二氢钾:天津市科密欧化学试剂研发中心。级琥珀酸还未实现规模化和产业化,生产成本限制了其1.1.2培养基在酱油中的使用,最重要的是直接在酱油中添加琥珀酸(1)斜面培养基采用马铃薯葡萄糖琼脂(potatodex-[9-11]也难以被消费者接受。而琥珀酸作为酱油中的呈味物troseagar,PDA)培养基:马铃薯200g,葡萄糖20g,琼脂质,对于酱油的品质有着重要的意义。以目前我国酱油酿20g,水1000mL,pH值自然。0.1MPa灭菌20min。造生产使用的米曲霉AS3.042
8、为出发菌株,经过紫外线和(2)筛选培养基采用查氏培养基:蔗糖3g,NaNO30.3g,亚硝基胍诱变,以期筛选出一支富产琥珀酸、适合酱油酿K2HPO40.1g,KCl0.05g,MgSO40.05g,FeSO
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