米根霉产l-乳酸优良菌株的同步辐射诱变选育及发酵特性研究

《米根霉产l-乳酸优良菌株的同步辐射诱变选育及发酵特性研究》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、分类号：：竺!呈密级：——单位代码：】Q墨墨旦学号：竺竺!!竺!!!堡加学大警ofTechnology硕士学位论文MASTERDISERTATIoN②论文题目：兰堡雯!!!!竺竺皇堕竺竺里兰塑墅诱变选育及发酵特性研究学位类别：学科专业：(工程领域作者姓名：导师姓名：完成时间：学历硕士农产品加工及贮藏工程肖小发姜绍通教授2007年6月米根霉产L一乳酸优良菌株的同步辐射诱变选育及发酵特性研究摘要米根霉发酵产L．乳酸具有营养要求简单、产品光学纯度高等优点，但也存在产量不高、副产物含量较多等不足，因此优良菌株的诱变选育具

2、有一定的现实意义．同步辐射软x射线具有能谱宽且连续、精确可调、单色性好、可精确计算辐照剂量等特点，可提供生物分子所具有的Ck、Nk、Ok波长的射线，在生物学领域有着广泛的用途．本文采用同步辐射2．3nm、3．2nm、4．4nm波长软X射线对米根霉As3．819孢子进行辐射诱变，结果表明：抽真空时间对米根霉孢子的存活率有很大影响，时间越短存活率越高；Ck软x射线诱变存活率最低，筛选得到的突变株最少，主要产生在高剂量区；Nk效果较好，突变株产生在低剂量区；Ok诱变存活率最高，筛选得到的突变株最多，在不同剂量范围内均有

3、产生，诱变效果最佳。采用YPD平板．大平皿点样．乳酸平板筛选得到3株突变株，经过发酵验证确定C．60为最优突变株。通过单因素和正交试验，优化C．60突变株的发酵培养基组成，确定其最佳培养基组成为：120g／L葡萄塘、1g／L硫酸铵、O．3g／L硫酸镁、O．3g／L磷酸二氢钾、0．44g／L硫酸锌。在此条件下C．60突变株发酵72h后乳酸产量为98．4g／L，乙醇产量为5．1g，L，斜面转接7代后其摇瓶产乳酸能力基本稳定。比较C．60突变株与出发菌株5L罐发酵的结果发现：突变株乙醇脱氢酶活力为14U／ml，降低了2

4、6．3％，乙醇产量为5．2g，L，减少了23．8％；乳酸脱氢酶活力为17U／ml，提高了6．3％，乳酸产量为98．19，L，仅提高2％t富马酸产量为0．05g／L，降低了73．7％。实验结果说明C．60突变株具有较好的发酵特性，也进一步验证了同步辐射软x射线的诱变效果和筛选方法的可行性。关键词：同步辐射软x射线米根霉选育L．乳酸发酵特性ScreeningofeminentRhizopusoryzaeirradiatedbySynchronousradiationinL-lacticacidproductionan

5、dstudyonfermentativecharacterABSTRACTThefermentationofL-lacticacidbyRhizopusoryzaehassuchadvantagesassimplerequirementfornutritionandhighopticalpureproduct，butthedisadvantagesoflowoutputandhighcontentofby-productalsoexist．Therefore，itismeaningfultosceeneminen

6、tstrain．SoftX—rayofsynchronousradiation，whichiscontinuous，adjustableandmonochromatic，hastheCk、Nk、Okwave-lengthradiation．Itisextensivelyappliedinbiology．ThesoftX-rayofsynchronousradiation(wavelength2．3nm、3．2nm、4．4nm)wasusedinthispapertoirradiateonRhtzopusoryza

7、eAs3．819．Theresultsshowedthattheinfluenceofthevacuumtimeonmortalitywasobvious．TheresultsofYPDplatescreeningindicatedthatthemortalityofNksoftX-raywaslowerthanCksoftX-ray，mutagenicstrainsobtainedfromCksoftX-rayappearedinhighradiationdoseranges，andmutantsobtaine

8、dfromNksoftX—rayappearedinlowradiationdoseranges；themortalityofOksoftX—raywasthelowestandmutantsappearedindifferentradiationdoseranges·ThreemutantswereselectedthroughtheYPDplate、bromomcre