苹果总糖含量的测定.ppt

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1、项目9.2面包中蔗糖含量测定第一部分方法介绍一、测定原理样品脱脂后，用水或乙醇提取，提取液经澄清处理以出去蛋白质等杂质，再用盐酸进行水解，使蔗糖转化为还原糖。C12H22O11+H2O=C6H12O6+C6H12O6（果糖）（葡萄糖）然后按还原糖测定方法分别测定水解前后样品液中还原糖含量，两者差值即为由蔗糖水解产生的还原糖量，即转化糖的含量，乘以换算系数（0.95）即为蔗糖含量。二、仪器及试剂（一）仪器250ml容量瓶，250ml烧杯，玻璃棒，漏斗，锥形瓶，酸式滴定管，铁架台，电炉，水浴锅，分析天平，打浆机，移液管，玻璃珠（二）试剂碱性酒石酸铜甲液，碱性酒石酸铜乙液，乙酸锌溶液，10

2、.6%亚铁氰化钾溶液，0.1%转化糖标准溶液，40%氢氧化钠，0.1%甲基红三、测定步骤（一）样品预处理1、将样品打成匀浆，精称样品m2克。2、在有滤纸的漏斗中用水分数次洗涤后取出滤渣，再用水洗涤漏斗和滤纸。取滤液备用。3、将滤液移入250ml的容量瓶中，加入200ml的水，再分别加入乙酸锌和亚铁氰化钾各5ml，加水至刻度，混匀沉淀，静置30min。4、用干滤纸过滤，弃去初滤液25ml，滤液备用。吸取滤液两份各50ml备用。（二）转化糖标准溶液的配制1、称取105℃烘干至恒重的纯蔗糖1.9000g，用水溶解并移入1000ml容量瓶中，定容混匀。2、取50ml于100ml容量瓶中，加6

3、mol/L盐酸5ml，在68～70℃水浴加热15min，取出迅速冷却，加2滴指示剂，用氢氧化钠溶液中和至中性，加水至刻度混匀。此溶液每毫升含转化糖1mg。（三）样品酸水解1、向一份样品中加入5ml6mol/L的盐酸，在60～70℃水浴中加热15min，取出于流动水下迅速冷却。2、样品水解液冷却后，应立即调至中性。可向溶液中加两滴甲基红，用40%氢氧化钠调至黄色。（四）碱性酒石酸铜溶液的标定1、准确吸取碱性酒石酸铜甲液和乙液各5ml，置于250ml锥形瓶中，加水10ml，加玻璃珠3粒。2、从滴定管滴加约9ml转化糖标准溶液，加热使其在2分钟内沸腾，准确沸腾30s，趁热以1滴/2秒的速度

4、继续滴加葡萄糖标准溶液，直至溶液蓝色刚好褪去为终点。记录消耗葡萄糖溶液的总体积。平行操作三次，取平均值按下式计算：F=C×V式中：F——10ml碱性酒石酸铜溶液相当于葡萄糖的质量mg；C——转化糖标准溶液的浓度，mg/ml；V——标定时消耗葡萄糖标准溶液的总体积，ml。（五）样品溶液预测定1、吸取碱性酒石酸铜甲液、乙液各5ml，置于250ml锥形瓶中，加水10ml，加玻璃珠3粒，加热使其在2min内沸腾，准确沸腾30s，趁热以先快后慢的速度从滴定管中滴加样品溶液，滴定时要始终保持溶液呈沸腾状态。待溶液蓝色变浅时，以1滴/2秒的速度滴定，直至溶液蓝色刚好褪去为终点。记录样品消耗液的体积

5、。2、以同样的方式预测定另一份溶液。（六）样品溶液正式滴定1、吸取碱性酒石酸铜甲液、乙液各5ml，置于250ml锥形瓶中，加水10ml，加玻璃珠3粒，从滴定管中加入比预测时已水解样品溶液消耗少1ml的样品溶液，加热使其在2min内沸腾，准确沸腾30s，趁热以1滴/2秒的速度继续滴加样液，直至溶液蓝色刚好褪去为终点。记录消耗样品溶液的总体积，平行操作三次，取平均值。2、以同样的方法测定未水解的样品溶液。四、结果计算蔗糖含=m1(100/v2100/v1)/[m2×(50/250)×1000×100×0.95(%)]式中：m1-10ml酒石酸钾钠铜溶液相当于转化糖的质量，mg；V1-测定

6、时消耗未经水解的样品稀释液体积，ml；V2-测定时消耗经过水解的样品稀释液体积，ml；m2-样品的质量，g。第二部分分组讨论制定方案原料：面包项目：面包中蔗糖含量测定方案完成后，上交，确定后再进行试验。第三部分方案实施根据各组方案，进行试验。第四部分注意事项1、为获得准确的结果，必须严格控制水解条件。取样液体积、酸的浓度及用量、水解温度和时间都不能随意改动，到达规定时间后应迅速冷却，以防止低聚糖和多糖水解，果糖分解；2、用还原糖法测定蔗糖时，为减少误差，测得的还原糖含量应以转化糖表示；3、滴定必须要在沸腾条件下进行；4、溶液必须进行预测。第五部分知识拓展苹果中可溶性总糖含量测定方法介

7、绍可溶性总糖的测定(蒽酮比色法)一、实验原理糖类在较高温度下可被浓硫酸作用而脱水生成糠醛或羟甲基糖醛后，与蒽酮(C14H10O)脱水缩合，形成糠醛的衍生物，呈蓝绿色。该物质在620nm处有最大吸收，在150µg/ml范围内，其颜色的深浅与可溶性糖含量成正比。这一方法有很高的灵敏度，糖含量在30µg左右就能进行测定，所以可做为微量测糖之用。一般样品少的情况下，采用这一方法比较合适。二、仪器、试剂和材料１、仪器分光光度计；电子天平；三角瓶；大管；试管架；漏斗；