茶叶中茶多酚类物质的提取与含量测定.doc

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1、茶叶中茶多酚类物质提取与含量测定系别：生物医药工程系班级：食品科学与工程一、目的要求1、了解茶叶中茶多酚及茶多酚的组成及性状；2、掌握溶剂提取法提取茶多酚的原理及方法；3、掌握萃取法分离有机溶剂中的茶多酚的操作方法；二、茶多酚总述1、组成：茶多酚是茶叶中酚类及其衍生物的总称，因此常称为多酚类。其主要成分是黄烷醇类、羟基-4-黄烷醇类、花色甘类、黄酮醇类和黄酮类。这些化合物都具有2-苯基苯并吡喃的基本结构，故统称为类黄酮物质。茶叶中绿原酸、鸡鈉酸、咖啡酸等酚酸类化合物也是茶多酚的组分之一。在茶多酚各组分之一黄烷醇类为主，黄烷醇类优异儿茶素类物质为主。2、性状：茶多酚是介

2、于淡黄色至茶褐色之间的无定型粉末，味涩，略有吸湿性，易溶于水，可溶于乙醇、甲醇、乙醚、丙酮、乙酸乙酯，微溶于油脂，不溶于氯仿及苯等有机溶剂。茶多酚具有较好的耐酸性，在pH<7时较稳定，在pH>7时则不稳定且氧化变色加快，呈红色。3.茶多酚的提取方法茶多酚提取工艺效果较好的是有机溶剂萃取法、离子沉淀提取法、树脂吸附分离法、超临界二氧化碳萃取法，其次是超声波浸提法、层析法、膜技术。4.贮存方法：贮存于阴凉通风干燥环境，并与有毒、有气味的物品隔离，避免直接与三价铁离子及碱性物质接触。三、实验原理有机溶剂萃取法：有机溶剂萃取法是传统的提取工艺。是利用茶叶中不同化合物在不同溶剂

3、中的溶解度不同进行提取分离。在粗茶叶萃取溶液中，除含有茶多酚以外，还含有咖啡碱、酯质、色素、植物多糖、有机酸、以及悬浮物，且茶多酚含量仅为25%～40%，所以大多数工艺用乙酸乙酯、氯仿等有机溶剂反复萃取的方法进一步除杂、纯化、精制。茶水用氯仿萃取可得到水层和有机层，咖啡碱存在于有机层，而茶多酚则存在于水层中，根据萃取及过滤原理，将有机层和水层分别进行浓缩、萃取，即可得到相应粗产物。溶剂萃取法一般的工艺路线图所示抽滤粗茶多酚水层溶剂层氯仿乙醇茶叶滤渣滤液浸提3次乙酸乙酯水层有机相乙酸乙酯浓缩液溶剂萃取法一般的工艺路线本法的优点是：稳定、可靠；缺点是：有效成分的含量和提取

4、率较低，通过以上工艺获得的茶多酚含量通常仅能达到50%～65%。四、仪器和药品仪器：天平；分析天平；铁架台；抽滤装置；超级恒温水浴槽；长颈漏斗一个；滤纸若干张；分液漏斗一个；100毫升的烧杯（三个）；玻璃棒一个；药品：1.乙醇水溶液（50％）；2.干茶叶原料；3.氯仿（分析纯）；4.Na2So4溶液馏水，五、实验步骤1、温度设定:打开超级恒温水浴电源开关，使温度达到90℃2、称量：称取30克干茶叶，放在100毫升小烧杯中。3、溶解：用量筒量取40毫升50％乙醇水溶液，倒入小烧杯中，用玻璃棒轻轻搅拌，使干茶叶完全浸润在乙醇溶液中。4、加热：将干茶叶和乙醇水溶液的混合液置

5、于超级恒温水浴槽中，加热20分钟。5、过滤：将加热完毕的混合液取出，冷却到室温；用长颈漏斗对混合液进行过滤，滤除茶叶残渣。再对残渣进行乙醇萃取.6、分离萃取：1)对分液漏斗进行试漏，调整好铁架台高度；2)用量筒量取20毫升氯仿①，置于100毫升小烧杯中；将茶叶滤液倒入分液漏斗中，再将氯仿倒入其中，再倒入少量Na2So4溶液②，轻轻摇匀，使之混合充分，静置，分层，上层应为茶多酚水溶液，呈茶色，下层为氯仿乙醇混合液，为无色。3)将下层溶液小心放至小烧杯中，上层溶液从分液漏斗上口倒置100毫升小烧杯中；7、抽滤浓缩：1)安装好减压抽滤装置；2)将布氏漏斗里的滤纸用少量茶多酚

6、水溶液润湿，开启抽气阀，一边缓慢倒入液体，一边抽滤。3）抽滤完毕，关闭抽气阀，干燥得到咖啡碱。8、萃取：1)水层用乙酸乙酯萃取得有机层。2)重复上步抽滤浓缩步骤，得茶多酚。9、称量：1)将布氏漏斗内的滤饼用玻璃棒小心刮出，置于洁净滤纸上；2)另取一张滤纸将粉末里的水分压干；3)用分析天平称量出茶多酚注：—向萃取体系中加入Na2So4溶液，可增加有机相和水相的极性差别，缩短茶多酚的提取时间。六、数据处理以计算茶多酚的含量为例：茶叶中茶多酚的百分含量计算公式为W=(Mc/M)*100％式中：Mc是最后提取出的茶多酚的质量，单位为g;M为最初称取的茶叶原料的质量，单位为g。

7、七、实验分析及注意事项：1、萃取时要严格控制下层液的流速，太快有可能使上层液损失，使测得的百分含量偏低；2、最后浓缩抽滤时，抽气阀不要开得太大，否则会使滤纸破损，导致产品损失；3、浓缩完毕后，要及时称量，否则由于茶多酚具有吸湿性，会使测得的结果偏高。4.使用的有机溶剂氯仿(CHCl3)有毒，使得产品和操作都不太安全；