茶叶中茶多酚、氨基酸的测定.ppt

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1、茶叶中茶多酚的测定茶多酚茶叶中多酚类物质占茶嫩梢干重的20％～35％，由约30种以上的酚类物质所组成，通称茶多酚。茶多酚的性质：能溶于水、乙醇、甲醇、丙酮、乙酸乙酯，微溶于油脂。对热、酸较稳定，2%的溶液加热至120℃并保持30min，无明显变化。在碱性条件下易氧化变质。1）茶多酚能清除活性氧自由基，且能有效消除脂质过氧化产物丙二醛，具有降血脂的显著功效。2）茶多酚还具有抑制痢疾、伤寒、霍乱、金黄色葡萄球菌等有害菌的作用。3）具有较强的抗放射性作用，以及在抗衰老，抑制瘤细胞，预防心脑血管疾病等方面都显示出很好的效应。是一种有开发前景的天然抗氧化剂。茶多酚的

2、功效：测定方法：高锰酸钾直接滴定法酒石酸铁比色法酒石酸铁比色法原理：酒石酸亚铁能与茶多酚生成蓝紫色络合物，络合物溶液颜色的深浅与茶多酚的含量成正比。因此可以用比色方法测定。仪器：分光光度计水浴锅，锥形瓶，容量瓶（100mL,25ml)试剂：（1）酒石酸亚铁溶液：称取FeSO4·7H2O1.000g，含4个结晶水的酒石酸钾钠5.000g，加蒸馏水溶解后，用蒸馏水稀释至1000mL（2）PH7.5的磷酸缓冲液茶多酚检验步骤：（l）样品溶液的制备方法：准确称取茶叶磨碎样品3g于500mL烧杯中，加入沸水350mL，在沸水浴中浸提45min，每隔10min摇动1次

3、，趁热抽滤，残渣用少量热蒸馏水洗涤2-3次，滤液倒入500mL容量瓶中，冷却至室温，用蒸馏水定容至刻度，摇匀，备用。（2）测定：吸取样品溶液1mL于25mL容量瓶中，加蒸馏水4mL，加酒石酸亚铁溶液5mL，摇匀，再加入PH7.5磷酸缓冲液稀释至刻度。以蒸馏水代替样品溶液加入同样的试剂作空白。(3)选择540nm波长和1cm的比色杯测定吸光度计算：式中：ω—茶多酚的含量，%A—样品溶液的吸光度值T—样品溶液的总体积，mLV—测定用样品溶液的量，mLm—样品质量，g7.826—用0.5cm比色杯，当吸光度为1.0时，试液中茶多酚的浓度为7.826mg/mL3.

4、913—用1cm比色杯，当吸光度为1.0时，试液中茶多酚的浓度为3.913mg/mL说明及注意事项：1、磷酸盐缓冲液在常温下容易生长霉菌，放冰箱中保存或临用时现配。2、样品溶液制备中的注意事项：（1）较透明的样液，如果味茶饮料，将样液充分摇匀后，直接取样测定。（2）较浑浊的样液，如果汁茶饮料、奶茶饮料等，称取充分混匀的样液25mL于50mL容量瓶中，加95%的乙醇15mL充分混匀，放置15min，用水定容至刻度，过滤。（3）含有碳酸气的样液，如农夫汽茶，量取充分混匀的样液100mL于250mL的烧杯中，称取其总量，于电炉上加热至沸，在微沸状态下加热10mi

5、n，以将二氧化碳排除，放冷，用水补足原来的质量，摇匀，备用。紫外-可见分光光度计的基本结构紫外-可见分光光度计的基本结构是由五个部分组成：即光源、单色器、吸收池（样品室）、检测器和信号指示系统。茶叶中游离氨基酸总量的测定茶叶水浸出物中具有α-氨基的有机酸且呈游离状态存在者，均称为茶叶游离氨基酸。原理：氨基酸在PH8.0时与茚三酮共热，产生紫色络合物，在570nm处测定其含量。实验步骤（l）样品溶液的制备方法：准确称取茶叶磨碎样品3g于500mL烧杯中，加入沸水350mL，在沸水浴中浸提45min，每隔10min摇动1次，趁热抽滤，残渣用少量热蒸馏水洗涤2-

6、3次，滤液倒入500mL容量瓶中，冷却至室温，用蒸馏水定容至刻度，摇匀，备用。（2）氨基酸标准曲线的绘制分别准确吸取0.0、1.0、1.5、2.0、2.5、3.0mL100mg/L氨基酸标准溶液于25mL容量瓶中，各加蒸馏水4mL，茚三酮溶液0.5ml和PH8.0缓冲溶液2ml，在沸水浴中加热15min，冷却后加水定容至25ml。放置10min，于570nm处，以空白试剂做参比溶液，测吸光度。以氨基酸浓度为横坐标，吸光度为纵坐标绘制标准曲线。样品测定准确吸取试液1ml于25ml容量瓶中，加入0.5mlPH8.0缓冲溶液和0.5ml茚三酮溶液，在沸水浴中加热

7、15min，冷却后定容至25ml。放置10min后，于570nm处，以空白试剂做参比溶液，测吸光度。计算X—茶叶中咖啡碱的质量分数。%c—咖啡碱的浓度，mgV1—样品溶液的总体积，mLV2—测定用样品溶液的量，mLm—样品质量，g