顶空液液萃取—气相色谱—质谱法用于白术挥发性成分研究

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1、顶空液液萃取—气相色谱—质谱法用于白术挥发性成分研究　　摘要：采用高温顶空液相萃取再转移的方法，对中药白术中挥发性成分进行萃取分离富集，采用顶空液液萃取气相色谱质谱（LPLPEGM）联用法进行测定，并与传统水蒸汽蒸馏法（）提取的挥发性成分进行对比。对各种测定条件和影响因素进行了考察，最佳萃取条件为：1mLPEG为高温萃取剂，样品用量12g，萃取温度12℃，萃取时间6min，再将萃取剂用1mL正己烷进行反萃取后进行GM分析；采用LPLPEGM鉴定了个组分，占总组分含量918%；鉴定了1个组分，占总组分含量9712%。两种方法共同检测到的组分有29个，均以苍术酮（A

2、tractylone）含量最高。结果表明，两种方法所提取的组分基本相同，可用于白术挥发性成分的测定。关键词：顶空液液萃取；气相色谱质谱；挥发性成分；白术；分离富集1引言挥发性有机化合物（Volatileorganiccompounds，VOs）常用提取法有水蒸汽蒸馏（）、8超声萃取（UE）、微波辅助萃取（MAE）、超临界流体萃取（E）、固相微萃取（PME）等。上述方法均存在一些缺点，如法提取时间长，挥发油中只能提取到油溶性成分；PME法萃取头易碎、寿命短，成本较高，多次使用存在交叉污染等问题。顶空液相微萃取（LPME）是近年发展的一种溶剂用量少、装置简单、灵敏度

3、较高的样品前处理方法。但也存在萃取剂多为低沸点有机溶剂，液滴体积小，不易操作，易挥发甚至掉落[7]，不易高温萃取，萃取时间短等缺点。为克服LPME的缺陷，本研究在其基础上建立了一种分析挥发性成分的新型前处理方法——顶空液相萃取再转移分离富集气相色谱质谱法，简称顶空液液萃取（eadspaceliquidphaseliquidphaseextractionLPLPE）分离富集GM测定法。采用不易挥发的高沸点试剂聚乙二醇（PEG）作为高温萃取剂代替传统的有机溶剂，可极大地提高萃取温度和延长萃取时间；摒弃单滴悬挂的方式，加大萃取剂的用量，有效避免了液滴不稳定易脱落挥发等

4、问题；扩大了样品与高温萃取剂之间的顶空交换面积，提高了萃取效率；用传统的有机溶剂对PEG层进行反萃取，将反萃取液进行GM分析。利用所建立的LPLPEGM测定了白术中挥发性成分。本方法8具有操作简单，快速，成本低，有机溶剂和样品用量少等特点，并有效克服了LPME液滴本身易挥发跌落等问题，同时提高了相对油相中水溶性物质的灵敏度。2实验部分21仪器与试剂G689NM97N气相色谱质谱联用仪（美国Agilent公司）；GZX97ME电热恒温鼓风干燥箱（上海博讯实业有限公司）；QE1高速中药粉碎机（武义县屹立工具有限公司）；顶空萃取瓶（6mm×mm）；顶空收集瓶（2mm×

5、8mm，自制）。聚乙二醇（PEG）2、、6、8，上海化学试剂厂；乙酸乙酯、丙酮、正己烷等均为分析纯。白术（产自浙江）。22色谱质谱条件PM色谱柱（m×2mm×2μm）；高纯氦（99999%）流速：8mLmin；进样口温度：2℃；程序升温：初温8℃，以℃min升至16℃，保持min；再以8℃min升至2℃，保持min。质谱条件：EI离子源；电子轰击能量：7eV；倍增电压：129V；离子源温度：2℃；接口温度：28℃；质量扫描范围：～amu；溶剂延迟：min。82实验方法21顶空液液萃取取12g白术样品（12目）置于顶空萃取瓶底部四周，取1mLPEG于顶空收集瓶内，

6、置于萃取瓶中央，盖紧瓶盖，放入12℃恒温箱内萃取6min，用1mL正己烷反萃取顶空收集瓶内的萃取剂，振荡混合再静置，待其分层后，吸取上层正己烷1μL进行GM分析。22水蒸汽蒸馏取g白术粗粉用挥发油提取器按常规水蒸汽蒸馏法提取6h，挥发油经无水Na2O干燥，收油率为11%，精密称取挥发油mg，用正己烷稀释倍。吸取1μL进行GM分析。结果与讨论1顶空液液萃取分离富集装置顶空液液萃取装置与操作步骤如图1所示。将中药粉末置于顶空萃取瓶底部四周，再将盛有特定萃取剂的顶空收集瓶置于顶空萃取瓶中央，适当加大萃取剂的用量和增加萃取剂液的气液接触面，有利于萃取尽快达到平衡和提高效

7、率。为避免挥发物的损失，顶空萃取瓶采用磨口塞适当密闭，并留有微气路以便加热时气体膨胀泄压，顶空萃取瓶整体置于恒温箱中。经一定时间恒温8萃取，用传统的有机溶剂对高温萃取剂中的富集物进行反萃取，振荡静置分层后，吸取上层待测物进行GM分析。2顶空液液萃取条件的优化21高温萃取剂的选择高温萃取剂应在较高温度下本身不易挥发而又具有一定萃取能力的液体，经选择以PEG较合适。PEG沸点高达2℃，蒸气压低不易挥发，与多种有机物有良好的相溶性。考察了PEG2，，6，8等的萃取效果（图2）。结果表明，其效果基本一致，无明显差异。因PEG2易带入戊乙二醇，六甘醇等杂质干扰；PEG8粘

8、度大，不易操作，故选择P