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1、乳酸菌和酵母菌混合培养条件优化研究摘要:对乳酸链球菌和酿酒酵母菌进行混合培养发酵，通过讨论溶氧、温度、pll值、接种最、接种比例和培养基对其发酵结束时活菌数的影响，确定两种菌在前期28°C摇床150r/min培养24h,后期37°C静置24h,初始pH为7.5,接种量为0.5%,接种比例乳酸菌：酵母菌为1%:0.5%,培养基为YEPD时，两者的活菌数水平达到最高值,乳酸菌达5.OX108CFU/mL,酵母菌达1.OX108CFU/mLo关键词:混合培养；酵母菌；乳酸菌StudyonOptimizationof
2、MixedCultureConditionsforLacticAcidBacteriaandYeastAbstract:LactococcuslactisandSaccharomvcescerevisiaewerecultivatedandfermentedtogether,andtheimpactsofdissolvedoxygen,temperature,pHvalue,inoculumsize,inoculationproportion,andculturemediumonthenumberofviab
3、lecountattheendoftheirfermentationwereinvestigatcd.Theoptimizedmixedcultureconditionsforthesetwobacteriawereobtainedasfollows:culturefor24hoursinshakerat150r/minat28°Cinearlierperiod,stewingfor24hoursat37°Cinlaterperiod,theinitialpHvaluewas7.5,theinoculumsi
4、zewas0・5%,theinoculationratiooflacticacidbacteriatoyeastwas1%：0.5%,andtheculturemediumwasYEPD.Undertheseconditions,thenumberofviablecountoflacticaciclbacteriaandyeastreachedthehighestvalue,being5.0X108and1・0X108CFU/mLrespectively.Keywords:Mixedculture;Yeast
5、;Lacticacidbacteria乳酸菌和酵母菌对人类来说，是非常有益的微生物菌种，人类在很早的时候就从大白然的变化屮学到了利用酵母菌进行酿酒、发面、制曲等T艺，利用乳酸菌制作风味乳制品等。在现代化工艺生产屮，越来越多的用到了两种菌进行发酵，例如发酵豆粕、微生态制剂等。但是对于两者混合培养发酵的报道还不是很多，两者Z间如果能够混合培养而且活菌数水平并不下降的情况下，可以大大节约发酵能源消耗。本文通过对2种菌混合培养条件的讨论，旨在为大规模生产乳酸菌和酵母菌提供理论基础。1材料与方法1.1材料1.1.1菌种
6、乳酸链球菌(Streptococcuslactis)、酿酒酵母菌(Saccharomvcescerevisiae)均为河南微生物饲料研究屮心保藏。1.1.2培养基MRS液体培养基：胰蛋白月东1%、酵母浸粉0.5%、匍萄糖2%、牛肉蛋白豚1%、吐温一801%、K2HP040.2%、结晶乙酸钠0.5%、柠檬酸三镀0.2%、MgSO4・7H200.02%、MnSO4・411200.005%,pH值6.8,用于制备乳酸菌种子液；YEPD培养基：胰蛋白脓2%、酵母浸粉1%、窗萄糖2%,用于制备酵母菌种了液；乳酸优化培养
7、基：酵母浸粉1%、葡萄糖0.5%、结晶乙酸钠0.5%、柠檬酸三钱0.2%、吐温一801%、K2IIP040.2%,用于混合培养时降低培养基成木；酵母优化培养基：豆粕粉3%.玉米粉2%、隸皮1%、葡萄糖3%,用于混合培养时降低培养基成木。以上培养基均在121°C下灭菌20mine1.1.3主要仪器设备立式高压灭菌锅、电子天平、显微镜、超净-T.作台、怛温摇床、温培养箱、pH计、1吨立式发酵罐。1.2方法1.2・1溶氧对混合菌体生长的影响在MRS液体培养基屮按乳酸菌：酵母菌为1:1的比例接种，前期150r/min
8、震荡培养，后期静置培养，培养温度为30°C，总培养时间为48h,虎荡时问设8、16、24、32h4个处理，培养完后分别检测乳酸菌和酵母菌的数量。1.2.2温度对混合菌体生长的影响在MRS液体培养基屮按乳酸菌：酵母菌为1：1的比例接种，前期150r/min震荡培24h,后期静置培养24h,培养温度设置为28°C恒温48h、28°C恒温24h,37°C恒温24h、37°C恒温48h3个温度梯度。培养完后
