RNA干扰下调PPP2R5C对T-ALL TCR Vβ亚家族分布和克隆增殖的影响.pdf

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1、第35卷第4期暨南大学学报(自然科学与医学版)Vo1．35NO．42014年8月JournalofJinanUniversity(NaturalScience＆MedicineEdition)Aug．2014RNA干扰下调PPP2R5C对T-ALLTCRv13亚家族分布和克隆增殖的影响徐艳，陈宇，周玲玲，刘思初，杨力建，陈少华，罗更新。，李扬秋(暨南大学1．再生医学教育部重点实验室；2．医学院血液病研究所，广东广州510632；3．第一附属医院血液科，广东广州510630)[摘要]目的：基于前期利用靶向PPP2R5C基因的小干扰RNA(P

2、PP2R5C-siRNA)抑制白血病T细胞增殖的结果，进一步了解PPP2RSC—siRNA对T—ALL样本中TCRv13亚家族基因谱系及其克隆性增殖情况．方法：利用PPP2R5C—siRNA转染2例初发未治疗T—ALL病人外周血单个核细胞(PBMC)，设无关序列对照组(sc)和空白对照组(Nc)；利用实时定量PCR检测PPP2c基因表达水平．利用RT—PCR扩增各组样本中24个TCRVB亚家族基因的互补决定区3(CDR3)；阳性产物进一步经基因扫描分析CDR3长度，了解其VB亚家族T细胞克隆性．结果：PPP2RSC—siRNA处理后明显下

3、调PBMC中PPP2R5C基因表达水平．2例初发T—ALL外周血中分别可检测到10和l7个Vp亚家族，多数Vp亚家族T细胞为多克隆性，病例1中V[39和Vp17为寡克隆性，而病例2中，VI314和Vp16呈寡克隆性；经过RNA干扰处理后，TCRVp亚家族表达率降低，仅检测到3和4个Vp亚家族，分别为v132，vl33，Vp16和Vp17．其中2个Vp家族的寡克隆性模式发生改变，病例1中，V[317转为多克隆，而病例2中，VBl6也转变为多克隆．结论：RNA干扰下调白血病T细胞PPP2R5C基因表达抑制细胞增殖时，在一定程度上影响TCRVp

4、亚家族T细胞增殖和克隆模式变化，对正常T细胞功能可能存在一定影响．[关键词]JPPP2c基因；小干扰RNA；T细胞一急性淋巴细胞白血病；T细胞受体VB基因；T细胞克隆性[中图分类号]R392．11；R733．71[文献标志码]A[文章编号]1000—9965(2014)04—0361—06doi：10．11778／i．jdxb．2014．04．005Influenceofdown-regulationofPPP2R5CbyRNAinterferenceonthedistributionandclonalexpansionofTCRv13s

5、ubfamilyinTcellsfrompatientswithT-ALLXUYah，CHENYu，ZHOULingling，LIUSichu，YANGLijian，CHENShaohua，LUOGengxin，LIYangqiu，(1．KeyLaboratoryforRegenerativeMedicineofMinistryofEducation；2．InstituteofHematology，MedicalCollege，JinanUniversity，Guangzhou510632，China；3．DepartmentofHema

6、tology，theFirstAffiliatedHospital，JinanUniversity，Guangzhou510630，China)[Abstract]Aim：BasedontheresultsthatsmallinterferingRNAtargetingPPP2R5Cgene[收稿日期]20l4一O3—3O[基金项目]国家自然科学基金项目(30871091)；广东省科技计划国际合作项目(2012B050600023)；广东省高等学校科技创新重点项目(cxzdl013)[作者简介]徐艳(1989一)，女，研究方向：白血病免疫

7、分子生物学通讯作者：李扬秋，女，研究员，博士研究生导师，Tel：020—85226877；E—mail：jnyangqiuli@163．Corn362暨南大学学报(自然科学与医学版)第35卷(PPP2R5C—siRNA)inhibitedtheprolifelationofleukemiaI’cells，weurtheranalyzetheeffectofPPP2R5C—siRNAonthedistributiunandclonalityofTcellsre('eptor(TCR)V13subfamilyinTcellsofpatient

8、swithTcell—acutelymphoblastieleukemia(T—ALL)．Methods：Peripheralbloodmononuclearcells(PBMC)froHI2