逍遥丸含药血清对人卵巢颗粒细胞内分泌功能的影响.pdf

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1、·1850·中医杂志2013年11月第54卷第21期JournalofTraditionalChineseMedicine，2013，Vo1．54，No．21实验研究逍遥丸含药血清对人卵巢颗粒细胞内分泌功能的影响杨宏敏宋翠淼。周楠陆君路帅马惠荣段彦苍徐华洲杜惠兰(1．河北医科大学中西医结合学院，河北省石家庄市新石南路326号，050091；2．河北医科大学基础课教学部)基金项目：国家自然科学基金资助项目(30772818)*通讯作者：duhuilan@163．com，(0311)86265087[摘要]目的探讨逍遥丸对卵巢颗粒细胞内分泌功能影响可能的分

2、子机制。方法12只Wistar大鼠随机分为逍遥丸低、中、高剂量组(每日灌服逍遥丸混悬液1ml／100g、2ml／100g、3ml／100g)和对照组(每日灌服生理盐水2ml／100g)，连续4天，于末次灌胃后1h大鼠股动脉采血制备低、中、高剂量逍遥丸大鼠含药血清及正常大鼠血清。收集行体外受精一胚胎移植患者卵泡液，提取颗粒细胞原代细胞培养24h，以低、中、高剂量逍遥丸大鼠含药血清以及正常大鼠血清分别与体外培养的人卵巢颗粒细胞共同孵育48h，分为逍遥丸低、中、高剂量组以及对照组。采用放射免疫方法测定培养液中雌二醇(Ez)、孕酮(P)、环磷酸腺苷(cAMP)

3、的水平，采用蛋白印迹法和实时定量荧光PCR法分别检测促卵泡素受体(FSHR)蛋白和FSHRmRNA、P450芳香化酶mRNA、过氧化物酶体增殖物激活受体一(PPART)mRNA在卵巢颗粒细胞的表达。结果与对照组比较，逍遥丸中、高剂量组培养液中E：、cAMP水平明显升高，逍遥丸低、中、高剂量组FSHR蛋白表达明显升高，逍遥丸高剂量组FSHR、P450芳香化酶mRNA表达明显升高，逍遥丸中剂量组PPAR7mRNA表达明显降低(P％0．05或P％0．01)。与逍遥丸低剂量组比较，逍遥丸高剂量组E、cAMP、FSHR蛋白及mRNA水平明显升高(P

4、结论逍遥丸可能通过增加卵巢颗粒细胞FSHR蛋白及其mRNA的表达，使FSH更好发挥促进卵泡发育、排卵的作用，并通过调节FSHR、cAMP、P450芳香化酶、E水平促进卵巢颗粒细胞的内分泌功能。[关键词]逍遥丸；颗粒细胞；内分泌；卵泡刺激素受体；卵巢功能失调EffectofXiaoyaoPillContainingSerumontheEndocrineFunctionofHumanOvarianGranulosaCellsYANGHongmin，SONGCuimiao，ZHOUNan，LUJun，LUShuai，MAHuirong，DUANYancang

5、，XUHuazhou，DUHuilan(HebeiMedicalUniversity，HebeiProvince050091)ABSTRACTObjectiveToresearchthepossiblemolecularmechanismofXiaoyaoPill(FreeWandererPil1)containingserumontheendocrinefunctionofovariangranulosecells．MethodsTwelveWistarratswererandomizedintoXiaoyaoPilllow—dose。middle—

6、doseandhigh—dosegroups(1ml／100g，2ml／100gand3ml／100gXiaoyaoPillsuspensionwasgavagedtoeachratdaily)andcontrolgroup(eachratwasgavagedwith2ml／100gnormalsalinedaily)．Theadministrationlastedfor4days．XiaoyaoPilllow-dose，middle—doseandhigh-doseratcontainingserumandnormalratserumwasprepa

7、redbycollectingbloodfromthefemoralartery1hafterthelastadministration．Thefollicularfluidofinvitrofertilizationandembryotransfer(IVFET)patientswascollectedtoextractgranulecellsandcultureprimarycellsfor24hours．XiaoyaoPilllow-dose，middle—doseandhigh—doseratcontainingserumandnormalra

8、tserumwasincubatedwithculturedhumanovariangranu