补肾调经方含药血清对体外培养的人卵巢颗粒细胞FSH/cAMP-PKA通路的影响.pdf

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1、中国中西医结合杂志2014年3月第34卷第3期CJITWM,March2014,Vo1.34,No.3·317·补肾调经方含药血清对体外培养的人卵巢颗粒细胞FSH/cAMP—PKA通路的影响宋翠淼’杨宏敏陆君周楠路帅段彦苍马惠荣徐华洲’杜惠兰摘要目的通过补肾调经方含药血清对体外培养的人卵巢颗粒细胞卵泡刺激素/环磷酸腺苷一蛋白激酶A(folliclestimulatinghormone/cyclicadenosinemonophosphate—proteinkinaseA,FSH/cAMP-PKA)通路的影响,探讨补肾调经方改善卵巢内分泌功能可能的分子

2、机制。方法收集行体外受精一胚胎移植(Invitrofertilization—embryotransfer,IVF.ET)患者卵泡液,提取颗粒细胞进行原代细胞培养24h,以低、中、高剂量补肾调经方人、大鼠含药血清以及正常人、大鼠血清分别与体外培养的人卵巢颗粒细胞共同孵育48h,分为补肾调经方低、中、高剂量组以及对照组。采用放射免疫方法测定培养液中雌二醇(estrogen,E)、孕酮(progesterone,P)、环磷酸腺苷(cyclicadenosinemonoph0sphate,cAMP)的水平,采用蛋白印迹法和Rea1.timePCR分别检测卵

3、泡刺激素受体(folliclestimulatinghormonereceptor,FSHR)蛋白和FSHR、P450芳香化酶(P450aromatase,P450arom)mRNA在颗粒细胞的表达。结果人含药血清组:与对照组比较,补肾调经方中、高剂量组培养液中EcAMP水平均明显升高(P<0.05),补肾强经方中剂量纽P明显降低(P

4、量组E均升高(P<0.01),cAMP明显升高(P<0.05,P

5、cipeContainingSerumonFSH,cAMP-PKAPathwayin/nvitroCul-turedHumanOvarianGranularCellsSONGCui—miao,YANGHong.min,LUJun,ZHOUNan.LUShuai,DUANYan—cang,MAHui—rong,XUHua-zhou。,andDUHui—lan7DepartmentofPhysiology,HebeiCollegeofTraditionalChineseMedicine,Shijiazhuang(050091),China;2Depart

6、mentofIntegrativeMedicalObstetricsandGynecology,HebeiCollegeofTraditionalChineseMedicine,Shiji-azhuang(050091),ChinaABSTRACTObjectiveToexplorethepotentialmolecularmechanismsforBushenTiaojingReci—pe(BTR)improvingtheendocrinefunctionofovariangranularcellsbyobservingtheeffectofBTR

7、con—tainingserumonfolliclestimulatinghormone/cyclicadenosinemonoph0sphate—proteinkinaseA(FSH/cAMP—PKA)pathwayininvitroculturedhumanovariangranularcells.MethodsTheprimaryovariangranularcellscollectedfrOminvitrofertilization—embryotransferpatientswereculturedfor24h.Thehu。manandra

8、tserumcontainingdifferentconcentrationsofBTR(1ow,mediu

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