纳米金对HepG2细胞血管内皮生长因子表达和分泌的影响.pdf

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1、·312·中华实验外科杂志2014年2月第31卷第2期ChinJExpSurg，February2014，Vo1．31，No．2·实验研究·纳米金对HepG2细胞血管内皮生长因子表达和分泌的影响蒙家兴潘运龙赵晓旭丁晖覃莉【摘要】目的观察纳米金(AuNP)对HepG2细胞血管内皮生长因子(VEGF)表达和分泌的影响。方法实验分为不同浓度AuNP(5、10、20g／L)处理组和对照组，HepG2细胞常规消化种板，培养24h后：AuNP处理组分别加入浓度为5、10、20L的AuNP溶液1ml；对照组加入等量无血清培养液，继续培养12h后：采用Westernblot法检测HepG2细胞

2、内VEGF的表达水平；酶联免疫吸附试验(ELISA)检测HepG2细胞VEGF的分泌水平；噻唑蓝(MTT)比色法检测HepG2细胞增殖率。改变HepG2细胞的培养条件(37~C／4℃)，观察AuNP对HepG2细胞VEGF分泌的影响。建立肝癌腹水瘤模型进一步观察AuNP对模型小鼠腹水VEGF水平及腹水量的影响。结果体外实验：各组HepG2细胞分泌的VEGF浓度分别为：对照组(35I．64±7．89)ng／L；5LAuNP组(285．62±3．45)ng／L；10g／LAuNP组(121．72±3．10)ng／L；20Ixg／LAuNP组(9．83±2．28)ng／L，P<0．0

3、5。各AuNP处理组(5、1O、2OL)HepG2细胞增殖率分别为：(98．98±7．57)％、(91．09±11．46)％、(92．13±5．65)％，各组AuNP对HepG2细胞增殖影响差异均无统计学意义(P>0．05)。体内实验：腹水瘤模型小鼠腹水VEGF水平及腹水体积分别为：XCN组(62．95±11．93)ng／L、(13．22±1．03)ml；AuNP处理组(27．12±8．58)ng／L、(5．21±0．62)ml，P<0．01。结论AuNP可以明显抑制HepG2细胞VEGF的表达和分泌，体内实验证实AuNP能够降低腹水瘤模型小鼠腹水VEGF水平，明显减少腹水量。

4、【关键词】癌，肝细胞；纳米金；血管内皮生长因子；腹水生成EfectofgoldnanoparticlesonexpressionandsecretionofvascularendothelialgrowthfactorbyHepG2cellsMengJiaxing，PanYunlong，ZhaoXiaoxu，DingHui，QinLi．DepartmentofGeneralSu~eu，theFirstAffiliatedHospitalofJinanUniversity，Guangzhou510632，ChinaCorrespondingauthor：PanYunlong，Em

5、aiZ：~anyl@jnu．edu．ca【Abstract】ObjectiveToobservetheinhibitoryeffectofgoldnanoparticlesontheexpressionandsecretionofvascularendothelialgrowthfactor(VEGF)byHepG2cells．MethodsHepG2cellsweresee—dedin96一wellplatesandtreatedwithdifferentconcentrations(5，10，and20Ixg／L)ofgoldnanoparticlesfor12h．Thec

6、oncentrationofVEGFproteinexpressedandsecretedbyHepG2cellswasdeterminedbyu—singWesternblottingandenzymelinkedimmunosorbentassay(ELISA)separately．TheproliferationrateofHepG2cellswasassessedbyusingmethylthiazoltetrazolium(MTT)assay．Formouseascitesmodelexperiments，H22cellswereintraperit0neallyin

7、jectedintoBALB／cnlice．After7days，goldnanoparticles(1mg／kg)wasadministeredthroughintraperitonealinjectionevery2daysoveraperiodof14days．Micewerethensacrificedandascitesfluidscollected．Thefluidaccumulationintheperitonealcarvity，aswellastheconcentratio