甲基转移酶对鼻咽癌细胞中DLC-1基因表达的影响.pdf

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1、第18卷第4期生命科学研究V0l

2、18No．42014年8月LifeScienceResearchAug．2014甲基转移酶对鼻咽癌细胞中DLC一1基因表达的影响冯湘玲，陈欢，刘卫东，张畅，祝斌，王磊，李敏，周文，姚开泰，2，任彩萍(1．中南大学肿瘤研究所，中国湖南长沙410078；2．南方医科大学肿瘤研究所，中国广东广州510515)摘要：肝癌缺失基因一1fdeletedinlivercancer—l，DLC一1)在多种肿瘤中呈现表达缺失或表达下调，这种异常表达主要与由DNA甲基转移酶(DNAmethyltrans

3、ferases，DNMTs)参与的启动子区异常甲基化有关。RT—PCR结果显示DLC一1在永生化鼻咽上皮细胞NP69和干扰DNMTs的5—8F细胞中的表达水平较未干扰的鼻咽癌细胞明显升高。甲基化特异性PCRmethylation—specificPCR，MSPCR)~果则表明说C一1启动子区在表达下调或缺失的鼻咽癌细胞中均存在异常高甲基化。而干扰DNMTs后5—8F细胞中DLC一1启动子区甲基化状态被逆转。其中特异性干扰DⅣ1后效果略为显著，提示DNA甲基转移酶活性对于鼻咽癌中DLC一1启动子区甲基化水平具有重要的调

4、控作用，而DNMT1的调控作用更为突出。关键词：DNA甲基转移酶(DNMTs)；肝癌缺失基因一1(DLC一11；甲基化；RNA干扰中图分类号：Q786文献标识码：A文章编号：1007—7847(2014)04—0292—07EfectsofMethyltransferaseonDC一1GeneExpressioninNas0pharyngealCarcinomaCellsFENGXiang-ling，CHENHuan，LIUWei-dong，ZHANGChang，ZHUBin，WANGLei，LIMin，ZHOUWe

5、n，YAOKai-tai，27RENCai-ping(1．CancerResearchInstitute，CentralSouthUniversity，Changsha410078，Hunan，China；2．CancerInstitute，SouthernMedicalUniversity,Guangzhou510515，Guangdong,China)Abstract：Deletedinlivercancer一1“)LC一11showslossofexpressionordown—regulationofexpr

6、essioninavarietyoftumorsbecauseofpromoterhypermethylationwithDNAmethyhransferases(DNMTs)．RT—PCRre—sultsshowedDLC-1expressionwerehi．gherincontrolnasopharyngealcelllineNP69and5—8FcellswhichwasknockdownofDNMT1．DNMT3AandDBthanall7NPCcelllines．Thepromoterhypermethyl

7、a—tionofDLC一1wasdetectedinall7NPCcelllinesbuttheD￡C一1promotercouldbepartiallydemethylatedin5—8FcellswithknockdownofDⅣTs．especiallyDNMT1withmoresignifecanteffect．Thus．ourdatasuggestedthatDNMTs，esp．DⅣMl，mightplayimportantrolesinmethylationmaintenanceofDLC-1inNPC．

8、Keywords：DNAmethyhransferases(DNMTs)；deletedinlivercancer一1(DLC-1)；methylation；RNAinte卜ference(RNAi)(／reScienceResearch，2014，18(4)：292～298)收稿日期：2014-02—18；修回日期：2014—04—23基金项目：国家973项目(2010CB833605)；教育部新世纪优秀人才支持计划项目(NCET一10—0790)；中南大学杰青培育项目(2010QYZD006)；国家自然科学基金项

9、目(30801322；81272972)；湖南省自然科学基金项目(10JJ4025)；中南大学贵重仪器设备开放共享基金资助项目作者简介：冯湘玲(1975-)，女，湖南道县人，博士，主要从事鼻咽癌变分子机制研究；’通讯作者：任彩萍(1972一)，女。湖南浏阳人，中南大学研究员，博士，博士生导师，主要从事鼻咽癌变分子机制研究和干细胞研究，E—mai